
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
猪肾小球系膜细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
肾组织
生长特性
贴壁培养
细胞形态
长梭形细胞
分类
猪原代细胞
货号
A01X2262
用途
仅供科研实验
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常肾组织。
2)细胞鉴定:结蛋白(Desmin)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:长梭形细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF 原代 肾系膜 细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
细胞简介:
肾系膜细胞是肾小球内非常活跃的细胞,具有分泌细胞基质、产生细胞因子、吞噬和大分子物质及类似平滑肌细胞收缩的功能。同时还可产生和降解多种细胞外基质,参与系膜基质及肾小球基底膜的修复与更新,在肾小球生理功能和病理反应中起着重要作用。
公司正在出售的产品:
食物支链淀粉比色法定量检测试剂盒
甲基化CpG结合域蛋白3样1抗体
MBD3L1
脱氧辅合酶蛋白抗体
DHPS
体外非细胞系统细胞色素P450亚酶2A6(COUMARIN)活性
四、细胞凋亡整体解决方案——Apoptosis
大鼠磷酸化糖原合成酶激酶3(pGSK-3)elisa检测试剂盒
纯化线粒体蛋白质浓度定量测定试剂盒
原钙粘蛋白γA8抗体
PCDHGA8
高迁移率族蛋白20A抗体
HMG20A
瞬时受体电位离子通道蛋白6抗体 Anti-TRPC6
配对盒基因1抗体 Anti-PAX1
细胞骨架蛋白C端PDLIM1抗体 Anti-PDLIM1
结合珠蛋白家族3A1抗体 Anti-SCGB3A1
PE-Cy5.5标记的兔抗狗IgG H&L
Rabbit Anti-Dog IgG H&L / PE-Cy5.5
磷酸化红细胞阴离子交换蛋白1抗体
phospho-Band3 (Tyr21)
锌指蛋白321B抗体 Anti-ZNF312B/FEZF1
膜相关的蛋白质HEM2抗体 Anti-NCKAP1/NAP125
受体激活蛋白激酶C1抗体 Anti-RACK1
监理蛋白抗体 Anti-Supervillin
大鼠apelin 13(AP13)elisa分析检测试剂盒
猪肾小球系膜细胞通用型苏木素复染试剂盒
小鼠凋亡蛋白酶激活因子1(APAF1)elisa检测试剂盒
4-phosphatase; Bisphosphate 3 prime nucleotidase; Bpnt1; BPNT1_HUMAN; BPntase; PAP inositol 1,4 phosphatase; PAP-inositol-1; PIP.
猪肾小球系膜细胞
大鼠肺成纤维细胞
NCI-H1703人非小细胞肺癌细胞
小鼠垂体瘤细胞;GT1-7
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。