
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
猪乳腺成纤维细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
组织
生长特性
贴壁培养
细胞形态
长梭形细胞
分类
猪原代细胞
货号
A01X2278
用途
仅供科研实验
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常组织。
2)细胞鉴定:纤维连接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:长梭形细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 Delf原代成纤维细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
细胞简介:
乳腺位于皮下浅筋膜的浅层与深层之间。浅筋膜伸向乳腺组织内形成条索状的小叶间隔,一端连于胸肌筋膜,另一端连于皮肤,将乳腺腺体固定在胸部的皮下组织之中。乳腺是哺乳动物少数可以重复经历生长、功能分化和退化过程的器官之一。纤维结缔组织伸入乳腺组织之间,形成许多间隔,这些纤维结缔组织对起固定作用,而纤维结缔组织是由成纤维细胞构成的。
公司正在出售的产品:
小鼠促甲状腺素(TSH)elisa分析检测试剂盒
人叶酸受体(FOLR)elisa检测试剂盒
鱼类组织汞元素荧光定量检测试剂盒
猪C肽(C-Peptide)elisa检测试剂盒
大鼠细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)elisa检测试剂盒
人环磷酸鸟苷(cGMP)elisa分析检测试剂盒
水中肠球菌(Enterococci)荧光定量检测试剂盒
猪17羟孕酮(17-OHP)elisa分析检测试剂盒
大鼠细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS-1)elisa检测试剂盒
尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶A1抗体 UGT1A1
葡萄膜自身抗原Uaca抗体 UACA
GPROPDR蛋白抗体 GPROPDR
G蛋白偶联受体174抗体 GPR174
乙酰化TRIM29蛋白抗体 TRIM29 (acetyl K116)
应激相关内质网蛋白1抗体 SERP1
二氢嘧啶酶相关蛋白2抗体 Phospho-CRMP2 (Thr514+Ser518)
芳香乙酰胺脱乙酰基酶样蛋白3抗体 AADACL3
外周蛋白2抗体 PRPH2
无精症缺失基因1抗体 DAZ1
SEM1蛋白亚型2抗体 Putative protein SEM1, isoform 2
Surb7蛋白抗体 Surb7
ADP核糖基化因子样蛋白4抗体 ARL4
AF680标记的血管内皮钙粘蛋白抗体 CD144/VE Cadherin, Alexa Fluor 680 conjugated
胶浆成熟因子γ/GMF-γ抗体 GMFG
卷曲螺旋结构域蛋白72抗体 CCDC72
大鼠活化蛋白C(APC)elisa分析检测试剂盒
猪乳腺成纤维细胞Rabbit Anti-Pig IgG H&L / Cy5.5
空通气孔样蛋白2抗体
Apoptosis repressor with CARD; ARC; Muscle enriched cytoplasmic protein; MYC; Myp; NOP; Nop30; Nucleolar protein 3 (apoptosis repressor with CARD domain); Nucleolar protein 3; Nucleolar protein of 30 kDa; NOL3_MOUSE .
猪乳腺成纤维细胞
大鼠肺微血管内皮细胞
NCI-H1666人肺支气管癌细胞
小鼠
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。