
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
猪肺微血管内皮细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
肺组织
生长特性
贴壁培养
细胞形态
上皮样 多角形细胞
分类
猪原代细胞
货号
A01X2252
用途
仅供科研实验
细胞特性:
1)细胞来源于实验动物的正常肺组织。
2)细胞鉴定:CD31荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:上皮样,多角形细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 Delf原代内皮细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
细胞简介:
肺微血管内皮细胞构成半选择性屏障,该屏障对于肺气体交换,调节液体和可溶物在血液与肺间质之间的流动具有重要意义。它还具有代谢功能,可以执行一定的非呼吸功能。在肺损伤中,肺微血管内皮细胞是活性氧类的重要靶细胞之一。
在肺炎的发生过程中,神经体液介质和氧化剂作用于内皮细胞,使得细胞间隙渗透性增加,蛋白质由血液进入间质。细胞间隙渗透性的增加导致低氧血症,出现呼吸窘迫综合征和非心源性肺水肿。
公司正在出售的产品:
Mouseanti-humangrowthhormoneantibodyIgGELISAKit
大鼠CD30分子(CD30)elisa分析检测试剂盒
CD30 ELISA Kit
人高尔基蛋白73(GP-73)elisa分析检测试剂盒
HumanGP-73ELISAKit
监理蛋白抗体 Anti-Supervillin
受体激活蛋白激酶C1抗体 Anti-RACK1
膜相关的蛋白质HEM2抗体 Anti-NCKAP1/NAP125
锌指蛋白321B抗体 Anti-ZNF312B/FEZF1
肝细胞核因子4γ抗体
HNF4 gamma
锌指蛋白744抗体
ANKZF1
大鼠转化受体电位阳离子通道亚家族M成员7(TRPM7)elisa检测试剂盒
载玻片细胞钙ATP酶PMCA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
小鼠白介素1可溶性受体Ⅰ(IL-1sRⅠ)elisa分析检测试剂盒
LB培养基LB Broth 250g
原钙粘附蛋白β1抗体
PCDHB1
源相互作用蛋白激酶4抗体
HIPK4
肿瘤坏死因子β抗体(TNFβ) Anti-TNF beta
多腺苷二磷酸多聚酶抗体/多聚ADP-核糖聚合酶1 Anti-PARP1
环指蛋白3抗体 Anti-PCGF3/RNF3
多配体聚糖结合蛋白1抗体 Anti-Syntenin 1
Cy7标记的小鼠抗兔IgG H&L
猪肺微血管内皮细胞5HT ELISA Kit
人干扰素诱导跨膜蛋白1(IFITM1/CD225/IFI17)elisa分析检测试剂盒
CHN 1; A-chimaerin; Alpha-chimerin; Alpha chimerin; ARHGAP2; CHIN_HUMAN; CHN; Chn1; N chimaerin; N chimerin; N-chimaerin; N-chimerin; NC; Rho GTPase-activating protein 2; RHOGAP2.
猪肺微血管内皮细胞
大鼠肝卵圆细胞
NCC-StC-K140人胃癌细胞
人正常肝细胞;QSG-770
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。