
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
羊肺成纤维细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
肺组织
生长特性
贴壁培养
细胞形态
长梭状细胞
分类
羊原代细胞
货号
A01X2293
用途
仅供科研实验
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常肺组织。
2)细胞鉴定:纤维连接蛋白(Fibronectin)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:长梭状细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF 原代 成纤维 细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
细胞简介:
成纤维细胞是肺间质中含量丰富的细胞种类。这些成纤维细胞与普通的相似,但也有其的特征,例如具有很长的伪足和细胞间的间隙连接。
肺成纤维细胞的主要功能为分泌肺泡隔基质中的 III型胶原,弹性蛋白以及蛋白多糖,也在肺部受损时担任重要的修复和重建功能。肺部受伤后,在炎症部位的一定程度的成纤维细胞积聚是肺部复原的关键步骤,过多或者不足的成纤维细胞聚集都会导致肺功能异常。
公司正在出售的产品:
VLDLRELISAKit
大鼠17-羟孕烯醇酮elisa分析检测试剂盒
Rat 17-Hydroxypregnenolone ELISA Kit
人附睾蛋白4(HE4)elisa分析检测试剂盒
HumanHE4ELISAkit
人甲状腺素(T4)elisa检测试剂盒
食品添加剂酪蛋白比色法定量检测试剂盒
猪促性腺抑制(GnIH)elisa分析检测试剂盒
大鼠信号转导分子1(Smad1)elisa检测试剂盒
干扰素诱导跨膜蛋白5抗体
IFITM5
调节蛋白AIRE抗体
AIRE
小鼠分泌型磷脂酶A2(sPLA2)elisa检测试剂盒免费代测
大鼠α-辅肌动蛋白1(ACTN-1)elisa检测试剂盒
血液谷丙酮酸转氨酶(GPT)活性光谱法定量检测试剂盒
人N端前脑钠素(NT-proBNP)elisa检测试剂盒
磷酸化内收蛋白gamma抗体
phospho-gamma Adducin (Ser693)
卷曲螺旋结构域蛋白49抗体
CCDC49
Toll样受体11抗体 Anti-TLR11
G蛋白偶联嘌呤受体p2y11抗体 Anti-P2Y11
蛋白酶体PSMα5抗体 Anti-Proteasome 20S alpha 5
硒结合蛋白1抗体 Anti-SBP1/Selenium Binding Protein 1
PE标记的羊抗小鼠IgM
羊肺成纤维细胞3-DPG ELISA Kit
人钙蛋白酶抑素抗体(ACAST-DⅣ)elisa分析检测试剂盒
Alternative, short form NMT S; Glycylpeptide N tetradecanoyltransferase 1; Long form, NMT L; Myristoyl CoA:protein N myristoyltransferase 1; N myristoyltransferase 1; NMT; NMT1; Peptide N myristoyltransferase 1; Type I N myristoyltransferase; NMT1_HUMAN.
羊肺成纤维细胞
大鼠骨骼肌微血管内皮细胞
Malme-3M人黑素瘤细胞
人食管上皮细胞永生化;SHEE
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。