
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
小鼠脂肪血管基质细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
脂肪组织
生长特性
贴壁培养
细胞形态
长梭形细胞
分类
小鼠原代细胞
货号
A01X1926
用途
仅供科研实验
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常脂肪组织。
2)细胞鉴定: CD44荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:长梭形细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 Delf原代基质细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
细胞简介:
脂肪血管基质组分( stromal vascular fraction,SVF)即脂肪组织去除成熟脂肪细胞后,所获得的具有干
公司正在出售的产品:
人肝细胞生长因子激活物(HGFA)elisa分析检测试剂盒
黄体**素(LH)elisa分析检测试剂盒
细胞丙二醛(MDA)比色法定量检测试剂盒
小鼠骨钙素(BGP)elisa检测试剂盒
大鼠白介素17(IL-17)elisa检测试剂盒
大鼠胰岛素样因子3(INSL3)elisa检测试剂盒
石蜡切片组织CASPASE-6蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
小鼠Toll样受体9(TLR-9/CD289)elisa检测试剂盒
乳酸脱氢酶(LDH)测试盒
FA83D蛋白抗体 FA83D
FasL(CD178)抗体 Fas Ligand
磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体 phospho-AMPK alpha-1 (Thr183)
磷酸化自噬相关蛋白4A抗体 phospho-ATG4A (Ser100)
代谢型谷氨酸受体1A抗体 GRM1
蛋白赖氨酸-6-氧化酶抗体 LOX
锌指蛋白639抗体 ZNF639
信号传导抑制蛋白WD重复蛋白2抗体 WD SOCS box protein 2
PE标记人CD5单克隆抗体 human CD5/PE
PTCD2蛋白抗体 PTCD2
受体表达蛋白5/息肉相关蛋白抗体 REEP5
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Nek11抗体 NEK11
活化T细胞核因子5蛋白抗体 NFAT5
肌肉特异性蛋白MYOZ2抗体 Myozenin 2
组蛋白去甲基化酶JMJ2A抗体 JMJD2A
22号染色体开放阅读框25抗体 C22orf25
组织乙酰化组蛋白H4染色质沉淀分析(CHIP)试剂盒
小鼠脂肪血管基质细胞Mouse Anti-Human IgG H&L (3D3) mAb / PE
信号传导T细胞活化相关蛋白抗体
GTP binding protein RAY; GTP-binding protein RAY; H ray; RAB1C; Rab35; RAB35 member RAS oncogene family; RAB35, member RAS oncogene family; RAB35_HUMAN; Ras related protein rab 1c (GTP binding protein ray); Ras related protein Rab 1C; Ras related protein Rab35; Ras-related protein Rab-1C; Ras-related protein Rab-35; RAY.
小鼠脂肪血管基质细胞
大鼠冠状动脉内皮细胞
Lu-134-B人小细胞肺癌细胞
人前列腺癌细胞;MDA-PCA-2B
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。