
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
小鼠内皮祖细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
骨髓血组织
生长特性
贴壁培养
细胞形态
梭状
分类
小鼠原代细胞
货号
A01X1933
用途
仅供科研实验
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常骨髓血组织。
2)细胞鉴定:CD31或CD34荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:梭状,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF原代内皮祖细胞培养体系 作为该细胞的培养基。
细胞简介:
内皮祖细胞是血管内皮细胞的前体细胞 ,在生理或病理因素刺激下,可从骨髓动员到外周血参与损伤血管的修复研究显示,内皮祖细胞在心脑血管、外周血管、肿瘤血管形成及创伤等方面均发挥重要作用,并为缺血性的研究提供了新思路。
内皮祖细胞具有游走特性,能进一步增殖分化的幼稚内皮细胞,缺乏成熟内皮细胞的特征性表型,不能形成管腔样结构。其功能主要为参与了出生后缺血组织的血管发生和血管损伤后的修复。
公司正在出售的产品:
人肝脏型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)elisa检测试剂盒
牛铜锌-过氧化物岐化酶(Cu/Zn-SOD)elisa分析检测试剂盒
体液丙二醛(MDA)比色法定量检测试剂盒
小鼠骨桥素(OPN)elisa分析检测试剂盒
大鼠白介素1受体(IL-1RⅠ)elisa检测试剂盒
狗15 - 酮基-13,14-二氢前列腺素F2α(15-keto-13,14-dihydro-PGF2α)elisa检测试剂盒
人体(apolipoprotein)RFLP基因分析试剂盒
小鼠超敏C反应蛋白(hs-CRP)elisa检测试剂盒免费代测
大鼠CD40配体(CD40L)elisa检测试剂盒
4号染色体开放阅读框3抗体 C4orf3
8号染色体开放阅读框33抗体 C8orf33
即刻早期应答基因5样蛋白抗体 IER5L
钾离子通道Kir2.1抗体 Kir2.1
ras基因相关蛋白Rab31抗体 RAB31
RPUSD4蛋白抗体 RPUSD4
死亡受体4抗体 TNFRSF10A
协转运蛋白4-A11抗体 SLC5A11
FKLF蛋白抗体 FKLF
GL54D蛋白抗体 GL54D
梅克尔-格鲁伯综合征相关蛋白抗体 MKS1
钠通道蛋白11α抗体 SCN11A
毒蕈碱型乙酰胆碱受体M1抗体 CHRM1/M-AChR M1
二甲基化组蛋白H3抗体 Histone H3 (Di Methyl K36)
血管紧张素III抗体 Angiotensin III
胰岛素受体底物-1抗体 IRS1
Annexin V-FITC/PI 双染细胞凋亡检测试剂盒20T
小鼠内皮祖细胞环磷酸腺苷(cAMP)elisa检测试剂盒
DTT1M 100ul
Amine oxidase [flavin containing] A; EC 1.4.3.4; MAO A; MAO-A; Maoa; Monoamine oxidase A; Monoamine oxidase type A; AOFA_HUMAN. 单胺氧化酶A
小鼠内皮祖细胞
大鼠脑微血管内皮细胞
HL-60 Clone 15人白血病细胞
人肺动脉平滑肌细胞;HPASMC
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。