
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
小鼠鼓膜上皮干细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
鼓膜组织
生长特性
贴壁培养
细胞形态
铺路石状细胞
分类
小鼠原代细胞
货号
A01X1984
用途
仅供科研实验
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常鼓膜组织。
2)细胞鉴定:广谱角蛋白(PCK)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:铺路石状细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 delf 原代 角质形成 细胞 培养体系 作为体外培养的培养基。
细胞简介:
鼓膜也称耳膜,为一弹性灰白色半透明薄膜,将外耳道与中耳隔开。鼓膜穿孔不能,可能与干细胞受损或增殖抑制有关。鼓膜上皮干细胞的分布与鼓膜的血供丰富的区域一致。
鼓膜上皮干细胞高表达 β1整合素,有很强的黏附型,对Ⅳ型胶原的黏附鼻其他细胞更快、更强。
公司正在出售的产品:
HMGB-1ELISAKit
仓鼠白介素3(IL-3)elisa分析检测试剂盒
IL-3 ELISA Kit
人电子转运黄素蛋白-泛醌氧化还原酶/电子转运黄素蛋白脱氢酶(ETFDH)elisa分析检测试剂盒
HumanETFDHELISAkit
细胞GRK4激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
人干扰素诱导T细胞趋化因子(ITAC/CXCL11)elisa检测试剂盒
大鼠胱天蛋白酶7(CASP7)elisa检测试剂盒
植物1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(RuBisCO)elisa检测试剂盒免费代测
支架蛋白IQGAP2抗体
IQGAP2
自噬相关蛋白10抗体
Apg10
细胞N-链接硫酸酯化糖胺多糖(N-sGAG)含量二甲基亚甲基蓝(DMMB)比色法定量检测试剂盒
小鼠白介素4(IL-4)elisa检测试剂盒
单胺氧化酶测试盒
CYP1A2蛋白共沉淀分析试剂盒
RAS癌基因家族蛋白RAB40A抗体
RAB40A
表皮生长因子样蛋白2抗体
CELSR2
葡萄糖神经酰胺合成酶抗体 Anti-UGCG/Ceramide glucosyltransferase
泛酸激酶2抗体 Anti-PANK2
Ⅱ型胶原α1 N端前体肽抗体 Anti-procollagen type IIA
精神障碍相关GAP蛋白抗体 Anti-srGAP3
APC标记的羊抗兔IgG H&L
小鼠鼓膜上皮干细胞小鼠16α羟基雌酮1(16-α OHE-1)elisa检测试剂盒
大鼠晚期糖基化端产物特异受体(AGER)elisa检测试剂盒
SNX 1a; Snx1; Snx1; SNX1_HUMAN; SNX1a; Sorting nexin 1; sorting nexin 1A; Sorting nexin-1; Vps5.
小鼠鼓膜上皮干细胞
大鼠腮腺细胞
CAL 51人乳腺癌细胞
大鼠骨髓瘤细胞;IR983F
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。