
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
兔脂肪微血管内皮细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
脂肪组织
生长特性
贴壁培养
细胞形态
铺路石状细胞
分类
兔原代细胞
货号
A01X2151
用途
仅供科研实验
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常脂肪组织。
2)细胞鉴定:血管假性血友病因子(vWF)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:铺路石状细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF 原代 内皮 细 胞培养体系 作为体外培养的培养基。
细胞简介:
微血管内皮细胞受损已被视为创伤、感染、休克、肿瘤、血管等多种和综合症发展的病理基础。一旦微血管内皮细胞受损,必然影响甚至破坏微血管内皮细胞正常的生物学功能,引起多种的发生。
微血管内皮细胞间连接与血管通透性有着非常密切的关系。微血管内皮细胞合成与分泌前列环素、一氧化氮、内皮源性超极化因子和内皮素等物质,来维持血管的正常状态。
公司正在出售的产品:
大鼠细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS-1)elisa检测试剂盒
大鼠泛素激活酶(E1/UBAE)elisa检测试剂盒
小鼠纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)elisa检测试剂盒
人八聚体转录因子(OTF2A)elisa检测试剂盒
血液硝酸盐含量荧光定量检测试剂盒
细胞结构型神经元一氧化氮合成酶(cNOS/NOS1/nNOS)活性荧光定量检测试剂盒
人补体3裂解产物(C3SP)elisa分析检测试剂盒
大鼠促微管蛋白聚合蛋白(TPPP)elisa检测试剂盒
小鼠诱导型一氧化氮合酶(NOS2)elisa检测试剂盒
嗅觉受体52E5抗体 OR52E5
血红素氧合酶2抗体 HO-2
蛋白激酶C zeta 抗体 PKC zeta
蛋白质磷酸酶2调节亚基1B抗体 PPP2R1B
FAM5B蛋白抗体 FAM5B
FITC标记人CD106单克隆抗体 human CD106/FITC
磷酸化周期素D3抗体 phospho-Cyclin D3 (Thr283)
磷酯酶Cγ1重组兔单克隆抗体 PLCG1
20号染色体开放阅读框107抗体 C20orf107
3号染色体开放阅读框54抗体 C3orf54
肌球蛋白3抗体 Myosin-3
激活激酶PAK7抗体 PAK5
PRDM1单克隆抗体 PRDM1
ras癌基因蛋白1抗体 RSU1
丝氨酸/苏氨酸SRP40抗体 SFRS5
羧肽酶A2抗体 Carboxypeptidase A2
组织甘肽(GLUTATHIONE)总浓度荧光定量检测试剂盒
兔脂肪微血管内皮细胞Goat Anti-Rabbit IgG H&L / PE-Cy5.5
细胞凋亡调控蛋白ZDHHC16抗体
bHLHa39; Class A basic helix-loop-helix protein 39; Dermis expressed protein 1; Dermis-expressed protein 1; DERMO 1; Dermo-1; DERMO1; MGC117334; Twist 2; Twist homolog 2 (Drosophila); Twist homolog 2; Twist related bHLH protein Dermo1; Twist related protein 2; Twist-related protein 2; Twist2; TWST2_HUMAN.
兔脂肪微血管内皮细胞
大鼠胃黏膜成纤维细胞
RAW 264.7小鼠单核巨噬细胞
U-118 MG人脑星形胶质母细胞瘤
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。