
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
兔小肠成纤维细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
小肠组织
生长特性
贴壁培养
细胞形态
长梭状细胞
分类
兔原代细胞
货号
A01X2054
用途
仅供科研实验
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常小肠组织。
2)细胞鉴定:纤维连接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:长梭状细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF 原代 成纤维 细 胞培养体系 作为体外培养的培养基。
细胞简介:
小肠位于腹中,上端接幽门与胃相通,下端通过阑门与大肠相连。小肠与心互为表里。是食物消化吸收的主要场所,盘曲于腹腔内,上连胃幽门,下接盲肠,全长约 5-6米,张开有半个篮球大,分为十二指肠、空肠和回肠三部分。其管壁外围有结缔组织,这些结缔组织由成纤维细胞构成,对小肠起到支持和保护作用。
公司正在出售的产品:
小鼠凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)elisa分析检测试剂盒
LSM14A蛋白抗体
LSM14A/C19orf13
细胞色素P450 2W1抗体
CYP2W1
冰冻切片过氧化酶活性(混合型)染色试剂盒
人白介素1可溶性受体Ⅱ(IL-1sRⅡ)elisa检测试剂盒
大鼠补体C5a(C5a)elisa检测试剂盒
小鼠血管紧张素Ⅱ(ANGⅡ)elisa检测试剂盒
ORC5L蛋白抗体
ORC5L
卤酸脱卤酶样水解酶域内含蛋白1A抗体
HDHD1A
金属蛋白酶组织抑制因子-1抗体(N端) Anti-TIMP-1(NT)
血小板源性生长因子受体A抗体(PDGFRα) Anti-PDGFRA
磷酸化酶β抗体 Anti-PHKB
溶质载体家族蛋白22成员5抗体 Anti-Slc22a5
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶ICK抗体
phospho-ICK (Tyr159)
嗅觉受体5T3抗体
OR5T3
锌指蛋白340抗体 Anti-ZBTB46/ZNF340/BTBD4
N-乙酰转移酶8B抗体 Anti-NAT8B
环指蛋白133抗体 Anti-RNF133
L选择素抗体 Anti-L-Selectin/CD62L
大鼠P物质(SP)elisa分析检测试剂盒
兔小肠成纤维细胞细胞胰腺脂酶活性比色法定量检测试剂盒
小鼠血小板反应蛋白3(THBS3)elisa检测试剂盒
HERV-W_7q21.2 provirus ancestral Env polyprotein; Endogenous retrovirus group W member 1; env; Env-W; Envelope polyprotein gPr73; Enverin; ENW1_HUMAN; ERVW; ERVW-1; Gp24; Gp50; HERV-7q Envelope protein; HERV-W envelope protein; HERVW; SU; Syncytin 1; Syncytin; Syncytin-1; TM; Transmembrane protein; Surface protein.
兔小肠成纤维细胞
大鼠心室心肌细胞
小鼠神经元细胞;NSC34
TCCSUP人膀胱癌细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。