
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
兔角质形成细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
皮肤组织
生长特性
贴壁培养
细胞形态
上皮样细胞
分类
兔原代细胞
货号
A01X2148
用途
仅供科研实验
细胞特性:
1)细胞来源于实验动物的正常皮肤组织。
2)细胞鉴定:广谱角蛋白((Pan Cytokeratin)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:上皮样细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF 原代 角质形成 细 胞培养体系 作为体外培养的培养基。
细胞简介:
角质形成细胞是一种不断分化的复层鳞状上皮细胞,其分化的终阶是形成角蛋白。根据角质形成细胞的发展阶段和特点,从内向外可将其分为五层。基底细胞层又称层,棘细胞层,颗粒层,透明层,角质层。
角质形成细胞的分化成熟表现为从基底层到向角质层的逐渐移行。在单一移行过程中,角质形成 ;细胞的形状和功能也逐渐发生着变化,从单层柱状上皮的基底层到扁平的细胞核消失的角质层。新生的基底细胞进入棘细胞层,然后上移到颗粒层的上层。
公司正在出售的产品:
MDHELISAKit
大鼠δ氨基乙酰丙酸脱水酶(ALAD)elisa分析检测试剂盒
ALAD ELISA kit
人花生四烯酸(AA)elisa分析检测试剂盒
AAELISAKit
NAD依赖性甘油醛-3-磷酸脱氢酶(NAD-Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase;NAD-GAPDH)活性光谱法定量检测试剂盒
人20S蛋白酶体(20SP)elisa检测试剂盒
大鼠ⅡD组磷脂酶A2(PLA2G2D)elisa检测试剂盒
小鼠磷脂酶A2(PL-A2)elisa检测试剂盒
鱼CD8分子(CD8)elisa分析检测试剂盒
CD8 ELISA kit
人表皮生长因子(EGF)elisa分析检测试剂盒
EGFELISAKit
动物软骨组织细胞分离培养试剂盒
大鼠胰岛素受体β(ISR-β)elisa检测试剂盒
通用型维生素A含量比色法定量检测试剂盒
小鼠SCAF11蛋白(SFRS2IP/CASP11)elisa检测试剂盒
转录因子源蛋白Nkx6.3抗体
Nkx6.3
8号染色体开放阅读框74抗体
C8orf74
突触融合蛋白结合蛋白5抗体 Anti-Tomosyn/STXBP5
磷酸化蛋白激酶AKT底物1抗体 Anti-Phospho-PRAS40 (Thr246)
维生素D低磷性佝偻病蛋白 Anti-PHEX
线性泛素链相关蛋白SHARPIN抗体 Anti-SHARPIN
Cy7标记的兔抗犬IgM抗体
兔角质形成细胞Goat Anti-Human IgM / Gold
锌指蛋白217抗体
BMP 9; BMP-9; Bone morphogenetic protein 9; GDF 2; GDF2; GDF-2; growth differentiation factor 2; GDF2_HUMAN.
兔角质形成细胞
人鼻腔黏膜上皮细胞
Caco-2人直肠癌细胞
SJSA-1人骨肉瘤细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。