
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
兔膈肌细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
膈肌组织
生长特性
贴壁培养
细胞形态
长梭状细胞
分类
兔原代细胞
货号
A01X2159
用途
仅供科研实验
细胞特性:
1)细胞来源于实验动物正常膈肌组织。
2)细胞鉴定:肌动蛋白(α-actin)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:长梭状细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF 原代骨骼肌细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
细胞简介:
膈肌是位于胸腔与腹腔之间的肌肉纤维组织,其周围为肌腹,中央为腱膜,是机体重要的呼吸肌。
组织学上,膈肌属骨骼肌,成熟的骨骼肌纤维不具有增殖能力。骨骼肌卫星细胞是骨骼肌与肌膜之间的一种体积较小的细胞,排列在肌纤维的表面,当肌纤维损伤后,可分化为肌纤维修复损伤。随着组织发育的成熟,肌卫星细胞数量相对减少。
公司正在出售的产品:
MHBELISAKit
仓鼠白介素6(IL-6)elisa分析检测试剂盒
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人淀粉状蛋白β(A4)前体蛋白结合家族B成员1(FE65)elisa分析检测试剂盒
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IQCK蛋白抗体
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碳酸酐酶11抗体
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通用型鱼气单细胞菌属(Aeromonas salmonicida)
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线粒体复合物III蛋白表达ELISA定量检测试剂盒
RAB3-GTP酶激活蛋白催化亚单位1抗体
RAB3GAP1
神经长卷曲螺旋蛋白2抗体
JAKMIP3
泛素化组蛋白H2AX抗体 Anti-Histone H2A.X (Ubiquityl Lys119)
泛酸激酶3抗体 Anti-PANK3
血小板白细胞C激酶底物源结构域M2抗体 Anti-PLEKHM2/SKIP
磷酸化神经生长相关蛋白SCG10抗体 Anti-phospho-STMN2/SCG10 (Ser50)
PE-Cy3标记的羊抗兔IgG H&L
兔膈肌细胞Mouse Anti-Guinea Pig IgG H&L / PE-Cy7
突触糖蛋白2抗体
D-fructose-6-phosphate amidotransferase 1; GFA; GFAT 1; GFAT; GFAT1; GFAT1m; GFPT; Gfpt1; GFPT1_HUMAN; Glucosamine--fructose-6-phosphate aminotransferase [isomerizing] 1; Glutamine--fructose-6-phosphate transaminase 1; Glutamine:fructose 6 phosphate amidotransferase 1; Hexosephosphate aminotransferase 1.
兔膈肌细胞
人胆囊微血管内皮细胞
A129L人非小细胞肺癌细胞
RWPE-2 人前列腺正常细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。