
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
兔肝成纤维细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
肝脏组织
生长特性
贴壁培养
细胞形态
长梭状
分类
兔原代细胞
货号
A01X2067
用途
仅供科研实验
细胞特性:
1)细胞来源于实验动物正常肝脏组织。
2)细胞鉴定:Vimentin荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:长梭状,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF 原代 成纤维 细 胞培养体系 作为体外培养的培养基。
细胞简介:
肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官,并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用。肝脏是尿素合成的主要器官,又是新陈代谢的重要器官。肝脏对来自体内和体外的许多非营养性物质如各种、毒物以及体内某些代谢产物,具有生物转化作用。通过新陈代谢将它们分解或以原形排出体外。在肝中及外围有部分结缔组织,这些结缔组织是由成纤维细胞组成。
公司正在出售的产品:
小鼠前白蛋白(PA)elisa检测试剂盒
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RNA聚丙烯酰胺凝胶电泳试剂盒
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17号染色体开放阅读框49抗体 C17orf49
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神经组织特异性F肌动蛋白结合蛋白抗体 Neurabin 1
视网膜色素变性蛋白26抗体 CERKL
ENTPD4蛋白抗体 ENTPD4
FAM21C蛋白抗体 FAM21C
磷酸化铁调节蛋白1抗体 phospho-Aconitase 1 (Ser138)
磷酸化真核翻译起始因子4E重组兔单克隆抗体 phospho-eIF4E (Ser209)
促进成骨细胞分化因子/GDPD2抗体 GDE3
蛋白S抗体 Protein S
锌指蛋白437抗体 ZBTB2
嗅觉受体52H1抗体 OR52H1
大鼠细胞色素P450家族成员1A1(CYP1A1)elisa检测试剂盒
兔肝成纤维细胞HGFA ELISA Kit
豚鼠钩端螺旋体IgG(Leptospira)elisa分析检测试剂盒
JNK1 + JNK3; JNK1 + 3; JNK1+JNK3; JNK1/3; c Jun N terminal kinase 1; JNK1; JNK3; JAK 1A; JAK1A; JNK 1; JNK 46; JNK; JNK1A2; JNK21B1/2; MAPK 8; MAPK8; Mitogen activated protein kinase 8; PRKM 8; PRKM8; Protein kinase JNK1; SAPK 1; SAPK gamma; SAPK1; c-Jun; Stress activated protein kinase JNK1; Tyrosine protein kinase JAK1; MK08_HUMAN.
兔肝成纤维细胞
人肺成纤维细胞
SNU-398人肝癌细胞
RSC96大鼠雪旺细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。