
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
人主动脉瓣膜间质细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
主动脉组织
生长特性
贴壁培养
细胞形态
长梭形、不规则细胞
分类
人原代细胞
货号
A01X1270
用途
仅供科研实验
细胞特性:
1)组织来源于人的正常主动脉组织。
2)细胞鉴定:平滑肌肌动蛋白(α-SMA)或波形蛋白(Vimentin)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:长梭形、不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 Delf原代间质细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
细胞简介:
主动脉瓣施半月瓣,位于左心室和主动脉之间,抑制射入主动脉的血液回流入左心室。主动脉瓣钙化可引起主动脉瓣狭窄关闭不全等,施导致老年退行性心瓣膜病的重要病理改变,其发病率随着年龄的增加而升高。
有研究表明,瓣膜间质细胞向城固细胞样细胞表型转化有可能是主动脉瓣膜钙化的病理改变基础之一。
公司正在出售的产品:
人1,5-脱水葡萄糖醇/1,5-脱水山梨(1,5-AG)elisa分析检测试剂盒
大鼠胰高血糖素样肽1(GLP1)elisa检测试剂盒
细胞样品氧化酶表达组织化学检测试剂盒
膜蛋白提取试剂盒(2D电泳用)50T
细胞可溶性总核蛋白制备试剂盒
冰冻切片组织GSK-3ALPHA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
牛1,25二羟基维生素D3(1,25 DHVD3)elisa检测试剂盒免费代测
保幼3(JH3)含量测试盒
小鼠精氨酸加压素受体1B(AVPR1B)elisa检测试剂盒
趋化因子结合蛋白2抗体 CCBP2
热休克因子结合蛋白1样蛋白1抗体 HSBP1L1
Histone H3.3重组兔单克隆抗体 Histone H3.3
kappa型受体抗体 kappa Opioid receptor
造血干细胞抗原CD133相关蛋白抗体 Prominin 2
整合素αM/巨噬细胞表面分子抗体 CD11b
富含亮氨酸重复蛋白6抗体 LRRC6
钙粘蛋白14抗体 FAT4
细胞角蛋白75抗体 KRT75
细胞衰老抑制基因抗体 RSL1D1
T细胞调控相关蛋白抗体 CRTAM
α1,4-N-乙酰葡糖胺转移酶α4Gn-T抗体 A4GNT
APC-Cy7标记小鼠CD62L单克隆抗体 mouse CD62L/APC-Cy7
ATP依赖RNA解旋酶DDX42抗体 DDX42
凯尔血型糖蛋白CD238抗体 CD238
老年痴呆相关类钙粘蛋白CS2抗体 CLSTN2
茶叶维生素U(S-Methylmethionine)比色法定量检测试剂盒
人主动脉瓣膜间质细胞Goat IgG / AF647
G蛋白γ13/Gγ13 抗体
IL2 Receptor gamma; IL2R gamma; IL 2R gamma; IL-2 receptor gamma precursor; IL2 Receptor gamma; CD132; CD 132; common cytokine receptor gamma chain; Gamma C; gamma(c); IL-2R gamma chain; IL2RG; IMD4; interleukin 2 receptor, gamma; P64; SCIDX; SCIDX1; Cytokine receptor common subunit gamma; Gamma C; gammaC; IL-2 receptor subunit gamma; IL-2R subunit gamma; IL-2RG; IL2RG_HUMAN; Interleukin-2 receptor subunit gamma; p64; SCIDX; SCIDX1.
人主动脉瓣膜间质细胞
人肝实质细胞
RKO-E6人结肠癌细胞
RAW 264.7+GFP小鼠单核巨噬细胞白血病细胞+GFP
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。