
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
人增生性瘢痕成纤维细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
增生性瘢痕组织
生长特性
贴壁培养
细胞形态
成纤维样细胞
分类
人原代细胞
货号
A01X1435
用途
仅供科研实验
细胞特性:
1) 细胞来源于手术切除的增生性瘢痕组织。
2) 细胞鉴定:纤维连接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5) 细胞生长方式:成纤维样细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 Delf原代 成纤维 细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
细胞简介:
增生性瘢痕由少量有组织的胶原纤维组成,缺乏粘液样基质。增生性瘢痕是深层真皮损伤的结果,尤其是创伤后形成的伤口和炎症、纤维化阶段延长的伤口。瘢痕大小于损伤范围,而不累计周围未受伤皮肤,能自行退化。
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谷氨酸受体2C抗体 Anti-NR2C/NMDAR2C
结肠抗原10抗体 Anti-SDCCAG10
Cy5标记的兔抗豚鼠IgM
人增生性瘢痕成纤维细胞活性蛋白提取试剂盒50T
通用型HRP-DAB底物显色试剂盒
Adipocyte differentiation inhibitor protein; Brevideltin; Delta like 1 homolog; Delta like homolog; Delta like protein; Delta1; DLK 1; DLK; DLK-1; Dlk1; DLK1_HUMAN; FA 1; FA1; Fetal antigen 1; pG2; Preadipocyte factor 1; Pref 1; Pref; Pref1; Pref-1; Protein delta homolog 1; Secredeltin; ZOG; Delta1; PREF1.
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MOLT-4人白血病细胞
PT-67小鼠源基于MLV-10A1逆转录病毒包装细胞系
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。