
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
人小肠粘膜上皮细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
小肠组织
生长特性
贴壁培养
细胞形态
上皮样 多角形细胞
分类
人原代细胞
货号
A01X1289
用途
仅供科研实验
细胞特性:
1)细胞来源于人正常小肠组织。
2)细胞鉴定:广谱角蛋白(PCK)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:上皮样,多角形细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 Delf原代上皮细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
细胞简介:
小肠位于腹中,上端接幽门与胃相通,下端通过阑门与大肠相连,是食物消化吸收的主要场所。一般根据形态和结构变化将小肠分为三段,分别为十二指肠,空肠和回肠。
小肠壁结构一般分 4层,由外向内依次为:浆膜层,平滑肌层,粘膜下层和粘膜层。粘膜层又分为3层:靠近粘膜下层的是一层平滑肌,称为粘膜肌层。其次为结缔组织,又称为固有层。后面向肠腔的是一层柱状上皮细胞构成的粘膜。
小肠粘膜有纵行和横行皱襞,并有无数细小的指状突起,称为绒毛。绒毛的基底处粘膜内陷成管状,称为利贝屈恩氏隐窝。隐窝基底部的上皮细胞不断地进行有丝分裂,
公司正在出售的产品:
RabbitOsteocalcinELISAkit
即早反应蛋白3相互作用蛋白1抗体
IER3IP1
乳腺癌易感基因复合物亚基蛋白3抗体
BRCC3
石蜡切片组织IGF 蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
绵羊成纤维细胞生长因子23(FGF23)elisa检测试剂盒
蛋白上样缓冲液非还原,5× 10ml
小鼠基质金属蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)elisa检测试剂盒
赖氨酸甲基化抗体
Methylated Lysine (di methyl , mono methyl )
脱氧核糖核酸酶2B抗体
DNASE2B
B细胞基因1抗体 Anti-TLE4
维甲酸诱导蛋白3抗体 Anti-RAI3
神经肽Y抗体 Anti-NPY/Neuropeptide Y
血管扩张刺激磷蛋白抗体 Anti-VASP
肿瘤蛋白D53抗体
TPD52L1
线粒体核糖体蛋白L42抗体
MRPL42
纺锤体组装异常蛋白6抗体 Anti-SASS6
紧密连接蛋白/小分子胶原蛋白OCEL1抗体 Anti-OCEL1
重组葡萄球菌蛋白A抗体 Anti-Protein A
扩张型心肌病蛋白1G抗体 Anti-Titin/CMD1G
亲和纯化小鼠IgG
人小肠粘膜上皮细胞鸡层连蛋白/板层素(LN)elisa分析检测试剂盒
麦黄酮蛋白电泳考马斯亮蓝染色试剂盒
Gamma glutamyl transpeptidase related enzyme; Gamma glutamyltranspeptidase 5; Gamma-glutamyl transpeptidase-related enzyme; Gamma-glutamyltransferase 5 heavy chain; Gamma-glutamyltransferase-like activity 1; Gamma-glutamyltranspeptidase 5; GGT 5; GGT REL; GGT-rel; GGT5; GGT5_HUMAN; DKFZP566O011; GGTLA1; Glutathione hydrolase 5; Leukotriene-C4 hydrolase; Gamma-glutamyltransferase 5 heavy chain.
人小肠粘膜上皮细胞
人冠状动脉内皮细胞
人肺癌细胞;NCI-H3255
PATU8988t(PATU8988)人胰腺癌细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。