
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
人胃癌相关成纤维细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
手术胃癌组织
生长特性
贴壁培养
细胞形态
长梭形
分类
人原代细胞
货号
A01X1316
用途
仅供科研实验
细胞特性:
1)细胞来源于人手术胃癌组织。
2)细胞鉴定:波形蛋白(Vimentin)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:长梭形,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 delf 原代成纤维细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
细胞简介:
癌组织由实质和间质两部分构成,癌细胞构成癌实质,是癌的主要成分,具有组织来源特异性,癌间质一般由结缔组织和血管组成,起支持和营养癌实质的作用,不具有特异性。
当实体瘤超过 1-2mm时,需要通过新生的血管和活化的癌相关成纤维细胞来获取癌细胞生长和增殖所必须的营养物质。其中,癌相关成纤维细胞可通过分泌多种细胞因子和生长因子来发挥促进癌血管**的作用。
上皮间质转化( EMT)是一种胚胎发育期的表型转化,在肿瘤转移过程中也能观察到相似的EMT过程。而由上皮和间质相互作用所形成的肿瘤-宿主界面微环境的平衡状态直
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基质金属蛋白酶11抗体
MMP11
双特异性磷酸酶抗体21抗体
DUSP21
肉蛋白1抗体 Anti-TMEFF2
环指蛋白111抗体 Anti-RNF111
核分布基因E源蛋白1抗体 Anti-NDE1
视神经视网膜相关蛋白VAX2抗体 Anti-VAX2
Cy7标记的兔抗人IgA
人胃癌相关成纤维细胞Rabbit Anti-Mink IgG H&L / PE-Cy7
GLP1类似蛋白Exendin4抗体
PMF1_HUMAN; Polyamine-modulated factor 1; PMF-1; Polyamine-modulated factor 1.
人胃癌相关成纤维细胞
人黑色素细胞
荧光素酶标记的人肾细胞腺癌细胞;ACHN-Luc
panc02小鼠胰腺癌细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。