
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
人食管纤维瘤细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
食管肿瘤组织
生长特性
贴壁培养
细胞形态
长梭形
分类
人原代细胞
货号
A01X1312
用途
仅供科研实验
细胞特性:
1)细胞来源于人食管肿瘤组织。
2)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
3)细胞生长方式:长梭形,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 Delf原代肿瘤细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
细胞简介:
食管纤维瘤来源于食管肌层,多数位于食管下段,肿瘤体硬,呈膨胀性生长。一般病程较长,数月直数年不等,为常见的良性食管肿瘤,多发性。体外分离和培养食管纤维瘤细胞,为研究食管纤维瘤生物学特性、机理等奠定了实验基础。
公司正在出售的产品:
大鼠高香草酸(HVA)elisa检测试剂盒
α-酮戊二酸含量测试盒
小鼠肝脏型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)elisa分析检测试剂盒
鸡分泌型球蛋白A(SIgA)elisa分析检测试剂盒
组织锂(lithium)化学比色法定量检测试剂盒
分泌和跨膜蛋白1抗体 Anti-SECTM1
磷酸化细胞周期检控Rad17蛋白抗体 Anti-Phospho-Rad17 (Ser645)
NADPH氧化酶活化蛋白1抗体 Anti-NOXA2/p67phox
受精卵抑制蛋白1抗体 Anti-ZAR1/Zygote arrest protein 1
细胞信号转导分子Smad-1抗体 SMAD1
限制过度增殖相关蛋白EML4抗体 EML4
α-甲基酰基辅酶A消旋酶抗体 AMACR
δ样蛋白4抗体 DLL4
ATP依赖解旋酶ERCC6抗体 CSB
B细胞链接激活蛋白抗体 NTAL
辣椒素受体抗体 TRPV1
链霉素抗体 streptomycin
中胚层诱导早期反应蛋白2抗体 MIER2
肿瘤抑制基因LPP2抗体 VANGL1
干扰素α2b抗体 Interferon alpha 2b
孤儿核受体抗体 RORC
KMT5A单克隆抗体 KMT5A
MAP7D3蛋白抗体 MAP7D3
染色质组装因子1P55抗体 CAF1p55/VPRBP
溶质载体家族蛋白30成员A9抗体 SLC30A9
细胞VEGF蛋白表达比色法定量检测试剂盒
人食管纤维瘤细胞Rabbit Anti-Goat IgM / Cy5.5
PRRC2B蛋白抗体
EPDR; Ependymin related protein 1 (zebrafish); Mammalian ependymin related protein 1; MERP 1; MERP1; UCC1; Upregulated in colorectal cancer gene 1.
人食管纤维瘤细胞
人甲状腺微血管内皮细胞
人胚肾细胞;HEK-293
OP9小鼠骨髓基质细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。