
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
人乳腺导管上皮细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
乳腺组织
生长特性
贴壁培养
细胞形态
上皮样 多角形细胞
分类
人原代细胞
货号
A01X1370
用途
仅供科研实验
细胞特性:
1)细胞来源于人正常乳腺组织。
2)细胞鉴定:细胞角蛋白(PCK)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:上皮样,多角形细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 Delf原代上皮细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
细胞简介:
乳腺导管位于胸部的皮下组织中,是的主要构成组织之一,也是乳汁的排泄管道。乳腺管的主要功能是乳汁的排泄和储存。每个乳腺叶都有一个输乳管,输乳管会在近处形成膨大的输入管窦,末端变细并开口于。
乳腺被结缔组织分隔为 15-25个 叶,每个叶又分为若干小叶,每个小叶是一个复管泡状腺。
腺泡上皮为单层立方或柱状,导管包括小叶内导管、上间导管和总导管。小叶内导管多为单层柱状或立方上皮,小叶间导管为复层柱状上皮,总导管又称输乳管,开口于,管壁为复层扁平上皮,下表皮相续。
公司正在出售的产品:
小鼠多聚蛋白2(MMRN2)elisa检测试剂盒
亚油酸(C18:2)含量试剂盒
牛乳体细胞分离试剂盒
猪磷酸甘油酸酯激酶2(PGK2)elisa检测试剂盒免费代测
大鼠血红素氧合酶1(HO1)elisa检测试剂盒
大鼠生长分化因子15(GDF15)elisa检测试剂盒
亮(LEUCINE)氧化高效液相色谱 (HPLC)分析试剂盒
维生素B1含量测试盒
RhoB鸟苷酸酶活性分析试剂盒
皮质素1抗体 Cortexin 1
鞘磷脂磷酸二酯酶4抗体 SMPD4
G蛋白偶联受体115抗体 GPR115
G蛋白信号转导调节因子17抗体 RGS17
抑瘤素M受体抗体 OSMR
原钙粘附蛋白20抗体 PCDH20
泛素载体蛋白R2抗体 CDC34B
呋喃他酮小鼠单抗 AMOZ
尾型源盒转录因子2重组兔单克隆抗体 CDX2
细胞分裂周期样激酶3抗体 CLK3
SPOP蛋白抗体 SPOP
TRIM27蛋白抗体 TRIM27
AF680标记的前列腺素E受体蛋白4抗体 EP4, Alexa Fluor 680 conjugated
AF750标记的血管内皮钙粘蛋白抗体 CD144/VE Cadherin, Alexa Fluor 750 conjugated
紧密连接蛋白1抗体(C端) CLDN1
跨膜蛋白208抗体 TMEM208
大鼠甲状腺素抗体(TAb)elisa检测试剂盒
人乳腺导管上皮细胞Rabbit Anti-FITC / FITC
糖脂转移蛋白结构域2抗体
tpr; TPR_HUMAN; translocated promoter region (to activated MET oncogene); TPR_HUMAN.
人乳腺导管上皮细胞
人颈动脉平滑肌细胞
人卵巢癌细胞;IGR-OV1
NOZ人胆囊癌细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。