
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
关节滑膜组织
生长特性
贴壁培养
细胞形态
成纤维样细胞
分类
人原代细胞
货号
A01X1409
用途
仅供科研实验
细胞特性:
1)细胞来源于手术取得的患类风湿性关节炎病人的关节滑膜组织。
2)细胞鉴定:纤维连接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:成纤维样细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 Delf原代成纤维细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
细胞简介:
滑膜是关节囊的内层,淡红色,平滑闪光,薄而柔润,由疏松结缔组织组成。关节腔内的所有结构,除关节软骨、半月软骨板以外 ,即便是通过关节腔的肌腱、韧带等均全部为滑膜所包裹。
滑膜分泌滑液,在关节活动中起重要作用。正常滑膜分为两层,即薄的细胞层 (内腔层)和血管层(内膜下层),是血管丰富的关节囊内膜,贴附于非关节面部分,覆盖于关节囊内的骨面上,不在软骨面上,此部分称为边缘区或裸区。滑膜呈粉红色,光滑发亮、湿而润滑,有时可见绒毛,内含胶原性纤维。
滑膜细胞有 A、B两型。巨噬细胞样A型细胞,表面有丝状伪足、浆膜内
公司正在出售的产品:
小鼠E-钙粘附分子(E-Cadherin/CDH1/CD324)elisa检测试剂盒
人碱性磷酸酶(ALP)elisa分析检测试剂盒
通用型人体鼻病毒(rhinovirus)定性检测试剂盒
羊elisa检测试剂盒
大鼠神经肽Y(NPY)elisa检测试剂盒
精浆(seminal plasma)氧化应激活性氧(ROS)WST-1比色法定量检测试剂盒
姜黄素含量试剂盒
盐析法大量蛋白浓缩沉淀试剂盒
小鼠多效生长因子(PTN)elisa检测试剂盒
DENND1A蛋白抗体 DENND1A
DNA修复蛋白Rad50抗体 RAD50
磷酸化蛋白激酶C α/β2重组兔单克隆抗体 Phospho-PKC alpha (Thr638)
磷酸化接头蛋白Gab 1抗体 Phospho-Gab1 (Tyr627)
胞粘蛋白2抗体 Cytohesin 2
补体因子B抗体 Factor B
线粒体铁转运蛋白2抗体 Mitoferrin 2/SLC25A28
心肌肌钙蛋白抗体 Cardiac Troponin I/TNNC1
NUDT10蛋白抗体 NUDT10
Pacific Blue标记小鼠CD62L单克隆抗体 mouse CD62L/Pacific Blue
上皮粘连调控蛋白ESRP2抗体 ESRP2
神经细胞分化相关蛋白AHNAK抗体 AHNAK
核仁蛋白14抗体 Nucleolar protein 14
核转录因子SOX14抗体 SOX14
轴突导向因子SEMA3E抗体 Semaphorin 3E
转运蛋白SEC24A抗体 SEC24A
大鼠骨钙素(OT)elisa分析检测试剂盒
人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞Donkey Anti-Goat IgG H&L / PE-Cy3
锌指蛋白909抗体
Blood group Rh(CE) polypeptide; Blood group RhCcEe antigen; CD240CE; CD240CE antigen; RH; Rh blood group antigen Evans; Rh blood group C antigen; Rh blood group, CcEe antigens; Rh polypeptide 1; Rh polypeptide I; RH30A; Rh4; RHC; RHCE blood group variant Crawford antigen Rh43; RHE; Rhesus blood group CE protein; Rhesus blood group E antigen; Rhesus blood group Rhce antigen; Rhesus blood group, CcEe antigens; Rhesus C/E antigens; Rhesus system C and E polypeptides; RhIVb(J); RHIXB; RHPI; RhVI; RhVIII; RHCE_HUMAN.
人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞
人脾成纤维细胞
人食管癌细胞;TE-13 (STR)
NCI-H292人非小细胞肺癌细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。