
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
人骨微血管内皮细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
骨组织
生长特性
贴壁培养
细胞形态
上皮样 多角形细胞
分类
人原代细胞
货号
A01X1436
用途
仅供科研实验
细胞特性:
1)细胞来源于人正常骨组织。
2)细胞鉴定:血管假性血友病因子(vWF)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:上皮样,多角形细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 delf原代 内皮 细胞培养体系 作为该细胞的培养基。
细胞简介:
骨的微循环系统是骨微环境的重要组成部分,是骨内物质交换,向骨及骨内其它细胞运送养料和排除废物的主要场所。通常,微循环血流能满足骨内各种组织代谢需要,使骨内各种细胞功能得以正常进行。
骨微血管内皮细胞构成了骨内微血管的内衬,其不仅仅是血管与周围组织之间的屏障,也与其它器官微血管内皮细胞一样,对局部骨组织代谢具有重要的调控作用,参与了许多骨的病理生理过程,再骨吸收、新骨的形成、血管再生、营养物质转运、骨内代谢产物输出及维持骨内微环境平衡方面具有重要作用。
公司正在出售的产品:
饮料D-葡萄糖酸盐比色法定量检测试剂盒
组织甘油-3-磷酸脱氢酶-2(Glycerol-3-Phosphate Dehydrogenase-2)活性比色法定量检测试剂盒
人百日咳病毒抗体(IgA)elisa检测试剂盒
大鼠成纤维细胞生长因子9(FGF9)elisa检测试剂盒
小鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)elisa检测试剂盒
溶质携带物家族-1抗体 Anti-SLC1A5
环指蛋白34抗体 Anti-RNF34
神经氨酸酶4抗体 Anti-NEU4
信号通路Wnt3a抗体 Anti-Wnt3a
转录接头蛋白EP300抗体
转绿激活蛋白SRCAP抗体 SRCAP
过氧化物酶体膜蛋白4抗体 PXMP4
核受体辅助抑制因子1抗体 NCoR1
NCK衔接蛋白1重组兔单克隆抗体 NCK1
N-钙粘附分子抗体 N-cadherin
乳腺癌易感基因环状结构域蛋白抗体 BARD1
神经丛蛋白A3抗体 Plexin A3
DDX58抗体 DDX58
DNA拓普西异构酶Ⅱ抗体 TOP2A
磷酸化蛋白激酶C mu型抗体 phospho-PRKD1 (Tyr463)
磷酸化剪接因子1抗体 phospho-SF1 (Ser82)
胞外分泌型丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶FAM20C抗体 FAM20C
补体C9b抗体 Complement component C9b
线粒体融合蛋白Mfn2单克隆抗体 Mitofusin 2
锌指蛋白366抗体 ZNF366
小鼠基质细胞衍生因子1α(SDF-1α/SDF1A)elisa检测试剂盒
人骨微血管内皮细胞小鼠25羟基胆固醇(25-OHC)elisa分析检测试剂盒
大鼠细胞凋亡调节因子BAX(BAX)elisa检测试剂盒
FKH L6; FKHL 6; FKHL6; Forkhead box F2; Forkhead box protein F2; Forkhead like 6; Forkhead related activator 2; Forkhead related protein FKHL6; Forkhead related transcription factor 2; FOX F2; FOXF 2; FREAC 2; FREAC2; OTTHUMP00000017863;
人骨微血管内皮细胞
人舌表皮细胞
人胰腺癌细胞;Patu8988T (STR)
NCI-H1993人非小细胞肺癌细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。