
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
人胆囊微血管内皮细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
胆囊组织
生长特性
贴壁培养
细胞形态
上皮样 多角形细胞
分类
人原代细胞
货号
A01X1307
用途
仅供科研实验
细胞特性:
1)细胞来源于人正常胆囊组织。
2)细胞鉴定:vWF荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:上皮样,多角形细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 Delf原代内皮细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
细胞简介:
胆囊,是位于右方肋骨下肝脏后方的梨形囊袋构造,有浓缩和储存胆汁之作用。胆囊壁由粘膜、肌层和外膜三层组成。微血管作为分布广的血管。它是连接微动脉和微静脉的血管。它们分支并互相吻合成网。管壁薄,通透性强。其功能是利于血液与组织之间进行物质交换。微血管管壁主要由一层内皮细胞和基膜组成。细的横切面由一个内皮细胞围成。
公司正在出售的产品:
beta;acid(includesglucosylceramidase)(GBA)ELISAkit
大鼠成纤维细胞生长因子8(FGF8)elisa分析检测试剂盒
FGF8 ELISA Kit
人甲状腺球蛋白(TG)elisa分析检测试剂盒
HumanThyroglobulinELISAKit
L选择素抗体 Anti-L-Selectin/CD62L
环指蛋白133抗体 Anti-RNF133
N-乙酰转移酶8B抗体 Anti-NAT8B
锌指蛋白340抗体 Anti-ZBTB46/ZNF340/BTBD4
植物环磷酸鸟苷(cGMP)elisa分析检测试剂盒
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人促卵泡素(FSH)elisa分析检测试剂盒
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谷氨酰胺酶(GLS)测试盒
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小鼠成纤维细胞生长因子8(FGF8)elisa分析检测试剂盒
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蛋白激酶锚定蛋白样蛋白2抗体
NBEAL2
FMO9P蛋白抗体
FMO9P
Ten-eleven转运基因1蛋白抗体 Anti-TET1/CXXC6
核糖体S6蛋白激酶β2抗体 Anti-p70 S6 Kinase Beta 2/P70 Beta 2
OS-9蛋白抗体 Anti-OS9
磷酸化SH2结构域转化蛋白1抗体 Anti-phospho-SHC(Tyr239/240)
Cy7标记的兔抗牛IgM
人胆囊微血管内皮细胞ACTN-1 ELISA Kit
人含球蛋白样环和上皮生长因子样域激酶1(Tie-1)elisa分析检测试剂盒
AMAP 1; AMAP1; AMAP-1; ARF GTPase activating protein 1; ASAP 1; Centaurin beta 4; CentB4; DDEF 1; DDEF1 protein; PAG 2; PAG2; PAG-2; PAP; PIP2 dependent ARF1 GAP; ZG 14P; ZG14P; Development and differentiation enhancing factor 1; 130 kDa phosphatidylinositol 4 5 biphosphate dependent ARF1 GTPase activating protein; ADP ribosylation factor directed GTPase activating protein 1; ASAP1_HUMAN.
人胆囊微血管内皮细胞
人胎盘间充质干细胞
HEK-293(人胚肾细胞)
NCI-H1437人肺癌细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。