
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
人CIK细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
外周血。
生长特性
悬浮培养
细胞形态
上皮样
分类
人原代细胞
货号
A01X1458
用途
仅供科研实验
细胞特性:
1) 细胞来源于外周血。
2) 细胞鉴定:CD3或者CD56荧光染色为阳性。
3) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
4) 细胞生长方式:悬浮培养。
推荐培养基
我们推荐使用 原代 CIK 细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
细胞简介:
CIK细胞,即细胞因子诱导的杀伤细胞,由于该细胞同时表达CD3+和CD56+两种跨膜蛋白,又称为NK细胞样T细胞,具有T细胞的抗瘤活性和NK细胞的非MHC限制性杀瘤特点。
CIK细胞对肿瘤细胞的识别能力强,能点射肿瘤细胞,且不会伤及正常细胞。尤其对手术后或放化疗后患者效果显著,能消除残留微小的转移病灶,防止癌细胞扩散,提高机体力。CIK细胞被认为是新一代的肿瘤过继细胞的方案之一。
公司正在出售的产品:
植物甘露糖6-磷酸异构酶(mannose-6-phosphate isomerase;MPI)电泳分析试剂盒
组织L-乳酸比色法定量检测试剂盒
人3氧代5α类固醇4脱氢酶2(SRD5A2)elisa检测试剂盒免费代测
大鼠B-细胞趋化因子1(BLC-1/CXCL13)elisa检测试剂盒
小鼠密封蛋白(OCLN)elisa检测试剂盒
肝素(heperin)纤维蛋白检测法(Fibrometer)分析试剂盒
核黄素转运因子2(RFT2)elisa检测试剂盒
磷酸二酯酶5A(Phosphodiesterase 5A)
小鼠弹性蛋白酶4(ELA4)elisa检测试剂盒
尿苷二磷酸葡萄糖脱氢酶单克隆抗体 UGDH
葡萄糖6-N-乙酰基转移酶1抗体 GNPNAT1
GR6蛋白抗体 GR6
G蛋白偶联受体179抗体 GPR179
乙酰化和磷酸化组蛋白H3抗体 Histone H3 (acetyl K9, phospho S10)
应激诱导分泌蛋白1抗体 SISP1
二氢嘧啶酶相关蛋白3抗体 CRMP3
芳香乙酰胺脱乙酰基酶样蛋白4抗体 AADACL4
外周蛋白单克隆抗体 Peripherin
无精症缺失基因2抗体 DAZ2
Sema6A抗体 Sema6A
SUSD1蛋白抗体 SUSD1
ADP核糖磷酸水解酶9抗体 NUDT9
AF680标记的血小板内皮细胞黏附分子1抗体 CD31, Alexa Fluor 680 conjugated
胶体金标记的β淀粉样肽(1-42)单克隆抗体 beta-Amyloid(1-42), Co-Gold conjugated
卷曲螺旋结构域蛋白117抗体 CCDC117
小鼠穿孔素1(PRF1)elisa检测试剂盒
人CIK细胞小鼠凝血因子Ⅷ(FⅧ)elisa分析检测试剂盒
人CD22分子(CD22)elisa检测试剂盒
alpha 2C Adrenergic Receptor; Adra 2c; Adra 2c; ADRA2C; ADRA2L2; ADRA2L2; ADRA2RL2; ADRA2RL2; ADRARL2; ADRARL2; Adrenergic alpha 2C receptor; Adrenoceptor alpha 2C; Alpha 2C adrenergic receptor; Alpha 2C adrenergic receptor subtype C4; Alpha 2C adrenoceptor; Alpha 2C adrenoreceptor; Alpha 2CAR; alpha2 AR C4; alpha2 AR C4; alpha2 C4; alpha2 C4; alpha2C; alpha2C; ALPHA2CAR; alpha2cii-adrenergic receptor; Subtype alpha2 C4; Subtype alpha2 C4; ADA2C_HUMAN.
人CIK细胞
人小胶质细胞
HRMC(肾小球系膜细胞)
MRC-5人胚肺成纤维细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。