
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
大鼠脂肪微血管内皮细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
脂肪组织
生长特性
贴壁培养
细胞形态
铺路石状细胞
分类
大鼠原代细胞
货号
A01X1659
用途
仅供科研实验
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常脂肪组织。
2)细胞鉴定:血管假性血友病因子(vWF)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:铺路石状细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 Delf 内皮 细胞 培养体系 作为体外培养的培养基。
细胞简介:
微血管内皮细胞受损已被视为创伤、感染、休克、肿瘤、血管等多种和综合症发展的病理基础。一旦微血管内皮细胞受损,必然影响甚至破坏微血管内皮细胞正常的生物学功能,引起多种的发生。
微血管内皮细胞间连接与血管通透性有着非常密切的关系。微血管内皮细胞合成与分泌前列环素、一氧化氮、内皮源性超极化因子和内皮素等物质,来维持血管的正常状态。
公司正在出售的产品:
SPELISAKit
新德里超级金属β-内酰胺酶-1(NDM-1)elisa分析检测试剂盒
NDM-1 ELISA kit
人白介素3(IL-3)elisa分析检测试剂盒
HumanInterleukin3ELISAKIT
人脯氨酸羟化酶(PHD)elisa检测试剂盒
果菜谷比色法定量检测试剂盒
猪可溶性P选择素(sP-Selectin)elisa检测试剂盒
大鼠血管性血友病因子裂解酶(vWF-cp)elisa检测试剂盒
脂氧合酶源结构域1抗体
LOXHD1
中性粒细胞蛋白BP30抗体
BPI
脑磺基转移酶样蛋白4A1抗体 Anti-SULT4A1
RNA结合蛋白38抗体 Anti-RBM38
神经调节肽S抗体 Anti-NMS/Neuromedin S
锌指蛋白195抗体 Anti-ZNF195
癌/睾丸抗原11.9抗体
SPANXN4/CT11.9
CREB调节转录激活因子3抗体
CRTC3
转录调节因子DEC2抗体 Anti-SHARP1/DEC2
磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶β1抗体 Anti-phospho-AMPK beta 1 (Ser182)
粘着斑激酶抗体 Anti-FAK/PTK2
转移生长因子α抗体(TGFα) Anti-TGF alpha
罗丹明标记猪IgG
大鼠脂肪微血管内皮细胞ChAT ELISA Kit
山羊C反应蛋白(CRP)elisa分析检测试剂盒
Gamma-glutamyltransferase light chain 1; Gamma-glutamyltransferase-like activity 4; Gamma-glutamyltransferase-like protein 6; GGTL1_HUMAN; GGTLC1.
大鼠脂肪微血管内皮细胞
人牙龈干细胞
WRL68人正常肝细胞
MOLM-14人急性髓系白血病细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。