
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
大鼠鼻腔粘膜上皮细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
鼻腔粘膜组织
生长特性
贴壁培养
细胞形态
铺路石状细胞
分类
大鼠原代细胞
货号
A01X1747
用途
仅供科研实验
细胞特性:
1) 组织来源于实验动物的正常鼻腔粘膜组织。
2) 细胞鉴定:广谱角蛋白(PCK)或细胞角蛋白-19(CK-19)荧光染色为阳性。经鉴定细胞纯度高于90%。
3) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
4) 细胞生长方式:铺路石状细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 delf原代 成纤维 细胞培养体系 作为该细胞的培养试剂。
细胞简介:
鼻腔粘膜是覆盖在动物体内呼吸器官管腔内壁的一层组织结构,由上皮组织和疏松结缔组织构成。鼻腔粘膜覆盖于鼻腔表面,粘膜下方为软骨、骨或骨骼肌。
上皮的垂直切面上,细胞形状不一。紧靠基膜的一层基底细胞为矮柱状,为具有增殖分化能力的干细胞,部分子细胞向浅层移动。基底层以上是数层多边形细胞,再上为几层梭形或扁平细胞。仅靠近表面几层细胞为扁平状,基底层细胞能不断分裂增生,以补充表层衰老或损伤脱落的细胞。复层扁平上皮深层的结缔组织内有丰富的,有利于复层扁平上皮的营养。
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核有丝分裂器NuMA蛋白抗体 Anti-NuMA
细胞骨架相关蛋白抗体 Anti-SM22 Alpha
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硝酸还原酶(NR)测试盒
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大鼠鼻腔粘膜上皮细胞
兔肌腱干细胞
F81猫肾细胞
LK-2人非小细胞肺癌细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。