
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
小鼠主动脉内皮细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
主动脉组织
生长特性
贴壁
细胞形态
内皮细胞样
分类
小鼠原代细胞
货号
A01X1776
用途
仅供科研实验
培养信息:
包被条件 PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
小鼠主动脉内皮细胞分离自主动脉组织;主动脉是体循环的动脉主干。其运行路径为:升主动脉起于左心室,至右侧第2胸肋关节高度移行为主动脉弓,弓行向左后至第4胸椎体下缘移行为降主动脉;在第12胸椎体高度穿膈的主动脉裂孔移行为腹主动脉,以上为胸主动脉,至第4腰椎体下缘分为左、右髂总动脉;髂总动脉在骶髂关节高度分为髂内、外动脉。主动脉内皮细胞是覆盖在主动脉内面的单层细胞,可分泌一系列血管活性物质而保持血管稳态,当其受到炎症或其它因素刺激后稳态被破坏而导致一些心血管的发生。因此,主动脉内皮细胞已成为研究心血管发病机制及的工具。内皮细胞或血管内皮是一薄层的专门上皮细胞,由一层扁平细胞所组成。它形成血管的内壁,是血管管腔内血液及其他血管壁(单层鳞状上皮)的接口。内皮细胞是沿着整个循环系统,由心脏直至小的微血管。
方法简介:
公司实验室分离的小鼠主动脉内皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的小鼠主动脉内皮细胞经CD31荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品:
小鼠溶质载体家族30成员10(SLC30A10)elisa检测试剂盒
小鼠β内啡肽(β-EP)elisa分析检测试剂盒
AMP含量测试盒
细胞CASPASE-3蛋白表达比色法定量检测试剂盒
脂蛋白酯酶(LPL)测试盒
猪多肽YY(PYY)elisa检测试剂盒
大鼠血管紧张素Ⅰ转化酶(ACE)elisa检测试剂盒
啤酒糟β-葡聚糖含量化学比色法定量检测试剂盒
小鼠CXC趋化因子配体16(CXCL16)elisa分析检测试剂盒
砷酸盐耐药蛋白ARS2抗体 ARS2
神经细胞鸟苷酸置换因子NGEF抗体 Ephexin-1
Myc tag标签单克隆抗体 Myc Tag
NLRP14蛋白抗体 NLRP14
猪蓝耳病病毒N蛋白抗体 PRRSV-N protein
转录因子KLF9抗体 KLF9
冠状病毒表面S蛋白抗体 SARS S-protein
核苷转运蛋白ENT1抗体 ENT1
小鼠抗瘦素单克隆抗体 Leptin
锌指蛋白275抗体 ZFP275
半胱胺酸蛋白酶蛋白9-p10抗体 caspase-9 p10
丙酮酸脱氢酶激酶亚型2抗体 PDK2
CTAGE6蛋白抗体 CTAGE6
DNAJC5G蛋白抗体 DNAJC5G
磷酸化γ连环蛋白抗体 phospho-gamma Catenin (Tyr550)
磷酸化三磷酸腺柠檬酸裂解酶抗体 phospho-ACLY (Ser455)
大鼠血管性血友病因子抗原vWF:Agelisa检测试剂盒
小鼠主动脉内皮细胞纯化线粒体冻存液(生物能量学保护)
苯丙氨酸解氨酶PAL测试盒 50T/48样 比色法
Interleukin 17F; Cytokine ML-1; IL-17F; IL17F_HUMAN; Interleukin-17F; CANDF6; ML1.
小鼠主动脉平滑肌细胞
兔角膜上皮细胞
CHL中国仓鼠肺细胞
L929小鼠成纤维细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。