
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
小鼠视网膜微血管周细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
视网膜组织
生长特性
贴壁
细胞形态
成纤维细胞样
分类
小鼠原代细胞
货号
A01X1992
用途
仅供科研实验
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每3-4天换液一次;
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传1-2代左右;
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
小鼠视网膜微血管周细胞分离自视网膜组织;视网膜居于眼球壁的内层,是一层透明的薄膜。视网膜由色素上皮层和视网膜感觉层组成,两层间在病理情况下可分开,称为视网膜脱离。色素上皮层与脉络膜紧密相连,由色素上皮细胞组成,它们具有支持和营养光感受器细胞、遮光、散热以及再生和修复等作用。组织学上视网膜分为10层,由外向内分别为:色素上皮层、视锥、视杆细胞层、外界膜、外颗粒层、外丛状层、内颗粒层、内丛状层、神经节细胞层、神经纤维层、内界膜。视网膜内层为衬于血管膜内面的一层薄膜,有感光作用;后部鼻侧有一视神经。视网膜上的感觉层是由三个神经元组成。神经元是视细胞层,专司感光,它包括锥细胞和杆细胞。视杆细胞主要在离中心凹较远的视网膜上,而视锥细胞则在中心凹处多。层叫双节细胞,约有10到数百个视细胞通过双节细胞与一个神经节细胞相联系,负责联络作用。第三层叫节细胞层,专管传导。视网膜是一层菲薄的但又非常复杂的结构,它贴于眼球的后壁部,传递来自视网膜感受器冲动的神经纤维跨越视网膜表面,经由视神经到达出口。视网膜的分辨力是不均匀的,在黄斑区,其分辨能力强。它是组成血管腔面单层扁平上皮样细胞,它所产生和分泌的生物活性物质对维持血管张力、调节血压、抗血栓形成等有重要作用,在视网膜血管的发病机制中有重要病理生理学意义。周细胞(pericyte)又称Rouget细胞和壁细胞,是一种包围全身和静脉中内皮细胞的细胞,可以收缩。周细胞嵌入内皮细胞的基膜中,通过物理接触和旁分泌信号与内皮细胞进行细胞通讯,监视和稳定内皮细胞的成熟过程。此外,周细胞还具有调控血流量、细胞碎屑和吞噬以及血脑屏障渗透性的作用,其多功能性是目前研究的热点之一,所以对血管周细胞的生物学特征、标记物、细胞功能等的研究都为相关研究提供基础资料。周细胞产生手指状的外延以调控的血流量。周细胞和内皮细胞之间共同拥有一个基膜,基膜上有多种细胞连接,包括多种整合素、神经钙黏素、纤连蛋白以及接合素。它还参与直径的双向调控;受损时,周细胞还可增殖,分化为内皮细胞和成纤维细胞。
方法简介:
公司实验室分离的小鼠视网膜微血管周细胞采用中性蛋白酶-胶原酶联合消化法制备而来制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的小鼠视网膜微血管周细胞经α-SMA荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品:
DNA末端平滑补缺位素([35S]dATP)聚合酶标记试剂盒
细胞肉毒碱棕榈酰转移酶II(CARNITINE PALMITOYL-TRANSFERASE II)活性比色法定量检测试剂盒
人和肽素(copeptin)elisa分析检测试剂盒
大鼠环加氧酶2(COX-2)elisa检测试剂盒
植物跨膜蛋白提取试剂盒100T
鱼热休克蛋白90(HSP-90)elisa检测试剂盒
大鼠水通道蛋白5(AQP-5)elisa检测试剂盒免费代测
酵母菌SD-URA培养基
细胞凋亡形态学检测试剂盒100T
神经生长调节蛋白1抗体 NEGR1
神经源性神经营养因子抗体 NDNF
NBPF6蛋白抗体 NBPF6
NXF5蛋白抗体 NXF5
转录激活蛋白crsp70抗体 APC70
转录增强因子TEF4抗体 TEF4
过氧化物酶-2单克隆抗体 PRDX2
核仁自身抗原SC65抗体 SC65
锌指蛋白127抗体 ZNF127
锌指蛋白423抗体 ZNF423
胞吐分泌蛋白Sec6抗体 EXOC3
补体C4d-A蛋白抗体 C4d-A
DCN1样蛋白4抗体 DCUN1D4
DNA损伤诱导转录样蛋白4抗体 DDIT4L
磷酸化蛋白激酶AKT底物1抗体 Phospho-AKT1S1 (Thr246)
磷酸化三羟基基辅酶A还原酶抗体 phospho-HMGCR (Ser872)
小鼠生长(GH)elisa检测试剂盒
小鼠视网膜微血管周细胞大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)elisa检测试剂盒
冰冻切片神经纤维银染试剂盒
Interleukin-1 receptor antagonist; ICIL 1RA; IL1 inhibitor; ICIL1RA; IL1F3; IL1RN; IRAP; IL1RA_HUMAN; IL1RA_MOUSE.
小鼠输尿管上皮细胞
兔脑皮层神经元细胞
KG-1a人急性髓性白血病细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。