
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
小鼠冠状动脉平滑肌细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
冠状动脉
生长特性
贴壁
细胞形态
成纤维细胞样
分类
小鼠原代细胞
货号
A01X1780
用途
仅供科研实验
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传3代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
小鼠冠状动脉平滑肌细胞分离自冠状动脉组织;冠状动脉是供给心脏血液的动脉,起于主动脉根部,分左右两支,行于心脏表面。采用Schlesinger等的分类原则,将冠状动脉的分布分为三型:右优势型、均衡型、左优势型。左右冠状动脉是升主动脉的对分支。左冠状动脉为一短干,发自左主动脉窦,经肺动脉起始部和左心耳之间,沿冠状沟向左前方行后,立即分为前室间支和旋支。前室间支沿前室间沟下行,旋支绕过心尖切迹至心的膈面与右冠状动脉的后室间支相吻合。它是构成冠状动脉壁的主要细胞成分,细胞膜上分布着多种离子通道,如电压依赖性Na+通道、多种Ca2+通道和K+通道;它们参与了静息电位的维持与细胞膜电位的复极化、超极化,调节血管平滑肌的收缩及舒张功能,此外动脉粥样硬化的发展也涉及冠状动脉平滑肌细胞增殖、炎症及凋亡等。因此,原代分离培养的冠状动脉平滑肌细胞,对研究生理和病理状态下离子通道及血管张力变化机制具有非常重要的作用。冠状动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。
方法简介:
公司实验室分离的小鼠冠状动脉平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的小鼠冠状动脉平滑肌细胞经α-SMA荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品:
大鼠核受体亚家族1D组成员2(NR1D2)elisa检测试剂盒
MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 500T
小鼠过敏/补体片断4a(C4a)elisa检测试剂盒
微量琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒 50次
石蜡切片结缔组织(CONNECTIVE TISSUE)摩罗利 (mallory)染色试剂盒
小鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)elisa分析检测试剂盒
大鼠激活素A(ACVA)elisa检测试剂盒
细胞PDGFRβ激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
人胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)elisa分析检测试剂盒
腺衍生血管内皮生长因子抗体 Prokineticin 1
凝溶胶蛋白抗体 Gelsolin
FOXJ2蛋白抗体 FOXJ2
GTP结合蛋白SAR1B抗体 SAR1B
胰岛素促进因子重组兔单克隆抗体 PDX1
乙酰化组蛋白H3抗体 Histone H3 (acetyl K9)
多巴胺受体D1重组兔单克隆抗体 DRD1
法尼基转移酶β-亚单位抗体 FNTB
突触核膜蛋白2抗体 Nesprin 2
微管蛋白β辅助因子D抗体 Beta tubulin cofactor D
RSPH3蛋白抗体 RSPH3
SH3BGRL2蛋白抗体 SH3BGRL2
8号染色体开放阅读框74抗体 C8orf74
AF594标记的单体樱桃红荧光蛋白标签抗体 mCherry, Alexa Fluor 594 conjugated
钾离子通道蛋白家族KCNQ1抗体 KCNQ1
卷曲螺旋结构域蛋白114抗体 CCDC114
冰冻切片组织P35蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
小鼠冠状动脉平滑肌细胞大鼠整合素α2(ITGA2)elisa检测试剂盒
通用型副伤A(Salmonella Paratyphi A)定性基因检测试剂盒
59 kDa; A 116A10.1; Amyloid beta precursor protein binding protein 1 59kD; Amyloid beta precursor protein binding protein 1 59kDa; Amyloid beta precursor protein binding protein 1; Amyloid beta precursor protein-binding protein 1; Amyloid protein binding protein 1; Amyloid protein-binding protein 1; APP BP1; APP-BP1; APPBP 1; HPP 1; HPP1; NAE 1; NAE1; NEDD8 activating enzyme E1 regulatory subunit; NEDD8 activating enzyme E1 subunit 1; NEDD8 activating enzyme E1 subunit; NEDD8-activating enzyme E1 regulatory subunit; Proto oncogene protein 1; Proto-oncogene protein 1; Protooncogene protein 1; ula 1; ULA1_HUMAN.
小鼠海马神经元细胞
兔视网膜微血管内皮细胞
LLC小鼠肺癌细胞
HT-29 (HT29)人结肠癌细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。