
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
小鼠骨髓单核细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
骨髓
生长特性
贴壁
细胞形态
巨噬细胞样
分类
小鼠原代细胞
货号
A01X1939
用途
仅供科研实验
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 巨噬细胞样
传代特性 不增殖;不传代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
小鼠骨髓单核细胞分离自骨髓;骨髓是机体的造血组织,位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种:红骨髓和黄骨髓。红骨髓能**红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用,白细胞能杀灭与抑制各种病原体,包括、病毒等;某些细胞能**抗体。因此,骨髓不但是造血器官,它还是重要的器官。骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨质间的网眼中,是一种海绵状的组织,能产生血细胞的骨髓略呈红色,称为红骨髓。出生时,红骨髓充满全身骨髓腔,随着年龄增大,脂肪细胞增多,相当部分红骨髓被黄骨髓取代,后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。骨髓单核细胞是一种未成熟的单核细胞,在骨髓细胞中约占0.04%,被认为是破骨细胞的前体细胞,较外周血单个核细胞诱导的破骨细胞得率高、全骨髓诱导法产生的破骨细胞数量多,纯度高,较脾细胞诱导法分化效率高。骨髓单核细胞(BMMNCs)是从股骨或胫骨骨髓中分离提取出来的原代细胞,它属干细胞类型。目前,大多数研究用细胞分离液分离提取骨髓单核细胞,近也有采用磁珠分离法分离骨髓单核细胞。
方法简介:
公司实验室分离的小鼠骨髓单核细胞采用密度梯度离心法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的小鼠骨髓单核细胞经CD68荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品:
猪骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)elisa检测试剂盒免费代测
小鼠内脂素/内脏脂肪素(visfatin)elisa检测试剂盒
大鼠成纤维细胞生长因子11(FGF11)elisa检测试剂盒
组织氨基脲敏感性胺氧化酶(SSAO)活性比色法定量检测试剂盒
人白三烯B4(LTB4)elisa检测试剂盒免费代测
小鼠神经型一氧化氮合酶(NOS1)elisa检测试剂盒
大鼠肌球蛋白重链1(MYH1)elisa检测试剂盒
细胞PRAK激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
人肌细胞**素(MYOG)elisa分析检测试剂盒
中心体蛋白1+2抗体 Centrin-1+Centrin-2
肿瘤抑制基因p53抗体 p53 (FL-393)
干扰素α抗体 IFNA13
谷氨酸受体1抗体 NMDAR1
KPNA6蛋白抗体 KPNA6
MAPK调控蛋白TRB2抗体 TRIB2
热休克蛋白105抗体 HSP105
绒毛膜特异性转录因子GCM2抗体 GCM2
BTB/POZ结构域蛋白12抗体 SLX4/BTBD12
CD3抗体 CD3
利钠肽受体A抗体 Natriuretic Peptide Receptor A
磷酸化C端结合蛋白1抗体 phospho-CTBP1 (Ser422)
γ-谷氨酰羧化酶抗体 GGCX
白介素1β/IL-1β重组兔单克隆抗体 IL-1 beta
细胞色素P450 2B6抗体 Cytochrome P450 2B6
纤维鞘相互作用蛋白2抗体 FSIP2
犬CD4分子(CD4)elisa检测试剂盒
小鼠骨髓单核细胞细胞COLLAGEN I蛋白表达荧光定量检测试剂盒
小鼠白介素1β(IL-1B)elisa检测试剂盒
MBLX; CHCR; Cys3His CCG1 required protein; MBLX39; MBNL 3; MBXL; Muscleblind like protein 3; Muscleblind like X linked protein; Protein HCHCR; MBNL3_HUMAN.
小鼠骨髓间充质干细胞
兔输卵管平滑肌细胞
K7M2WT (K7M2-wt)小鼠骨肉瘤成骨细胞
HSF(SV40)人真皮成纤维细胞(原代细胞永生化)
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。