
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
兔羊膜间充质干细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
羊膜
生长特性
贴壁
细胞形态
成纤维细胞样
分类
兔原代细胞
货号
A01X2250
用途
仅供科研实验
培养信息:
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传3代左右
消化液:0.25%胰蛋白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔羊膜间充质干细胞体外培养周期有限;建议使用配套的生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞简介:
兔羊膜间充质干细胞分离自胎盘羊膜组织;胎盘(placenta)是哺乳动物妊娠期间由胚胎的胚膜和母体内膜联合长成的母子间交换物质的过渡性器官,由羊膜、叶状绒毛膜和底蜕膜构成。胎儿在中发育,依靠胎盘从母体取得营养,而双方保持相当的独立性。胎盘还产生多种维持妊娠的,是一个重要的器官。有些爬行类和鱼类也以胎生方式繁殖后代,胚胎生长出一些辅助结构如卵黄囊、鳃丝等与母体组织紧密结合,以达到母子间物质的交换,这样的结构称假胎盘。羊膜是胎盘的内层,与眼结膜组织结构相似,含有眼表上皮细胞,包括结膜细胞和角膜上皮细胞生长所需要的物质,其光滑,无血管、神经及,具有一定的弹性;在电镜下,其分为五层:上皮层、基底膜、致密层、纤维母细胞层和海绵层,羊膜基底膜和羊膜羊膜基质层含有大量不同的胶元,主要为Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型胶原和纤维粘连蛋白、层粘连蛋白等成份。羊膜细胞主要由羊膜上皮细胞和羊膜间充质细胞组成,均具有多分化潜能,可转化为神经元,且还有合成、释放生物活性物质和神经营养因子的功能。
方法简介:
实验室分离的兔羊膜间充质干细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的兔羊膜间充质干细胞经CD44荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品:
人骨形成蛋白4(BMP4)elisa分析检测试剂盒
犬Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)elisa检测试剂盒免费代测
全组织NADH心肌黄酶(NADH-TR)活性染色试剂盒
小鼠过氧化脂质/乳过氧化物酶(LPO)elisa检测试剂盒
大鼠白介素33(IL-33)elisa检测试剂盒
小鼠细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)elisa检测试剂盒免费代测
大鼠肺表面活性物质相关蛋白C(SP-C)elisa检测试剂盒
组织纤维素酶(cellulase)活性比色法定量检测试剂盒
人蛋白酶体(prosome,macropain)亚基,β型,2(PSMB2)elisa分析检测试剂盒
5色氨酸羟化酶2抗体 TPH2
9号染色体开放阅读框5抗体 C9orf5
甲基化样蛋白2B抗体 METTL2B
间隙连接蛋白30/GJB6抗体 connexin 30
Rho GTP酶激活蛋白26抗体 GRAF
SAFB蛋白抗体 SAFB
髓鞘碱性蛋白/磷脂碱性蛋白抗体 MBP
糖脂转移蛋白结构域2抗体 GLTPD2
FRMD5蛋白抗体 FRMD5
GW182蛋白抗体 GW182
膜内蛋白酶5抗体 SPPL2C
脑环核苷酸门控通道蛋白1/HCN1抗体 HCN1
多发性肌炎/硬皮病自身抗原2抗体 EXOSC10
泛素蛋白抗体 Ubiquitin
血浆激肽释放酶轻链抗体 Plasma kallikrein light chain
胰腺弹性蛋白酶2B抗体 Elastase-2B
NAD激酶(NADK)测试盒
兔羊膜间充质干细胞小鼠γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)elisa分析检测试剂盒
大鼠脂肪酸去饱和酶1(FADS1)elisa检测试剂盒
CLR11.1; NACHT, leucine rich repeat and PYD containing 10; NACHT, LRR and PYD domains containing protein 10; NACHT, LRR and PYD domains-containing protein 10; NAL10_HUMAN; NALP10; NLR family, pyrin domain containing 10; Nlrp10; NOD8; Nucleotide-binding oligomerization domain protein 8; Nucleotide-binding oligomerization domain, leucine rich repeat and pyrin domain containing 10; PAN5; PYNOD.
兔胰岛细胞
兔牙髓干细胞
4T1小鼠乳腺癌细胞
HGC-27人胃癌细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。