
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
兔心脏微血管内皮细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
心脏
生长特性
贴壁
细胞形态
内皮细胞样
分类
兔原代细胞
货号
A01X2037
用途
仅供科研实验
培养信息:
包被条件:PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基:含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:内皮细胞样
传代特性:可传2-3代
消化液:0.25%胰蛋白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔心脏微血管内皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞简介:
兔心脏微血管内皮细胞分离自心脏组织;心脏是脊椎动物身体中重要的一个器官,主要功能是为血液流动提供压力,把血液运行至身体各个部分。心脏由心肌构成,左心房、左心室、右心房、右心室四个腔组成。左右心房之间和左右心室之间均由间隔隔开,故互不相通,心房与心室之间有瓣膜(房室瓣),这些瓣膜使血液只能由心房流入心室,而不能倒流。心脏的作用是推动血液流动,向器官、组织提供充足的血流量,以供应氧和各种营养物质,并带走代谢的终产物(如二氧化碳、无机盐、尿素和尿酸等),使细胞维持正常的代谢和功能。心脏微血管内皮细胞是组成心脏微血管腔面单层扁平上皮样细胞,它所产生和分泌的生物活性物质对维持血管张力、调节血压、抗血栓形成等有重要作用,在心脏血管的发病机制中有重要病理生理学意义。近年来大量研究表明,心肌微血管内皮细胞的功能和病理改变直接影响心肌细胞功能,也是诸多**、炎症因子及病毒等重要靶位,其作为体外研究的细胞模型在心肌缺血-再灌注发病机制和细胞间旁分泌细胞生长因子研究中起着重要作用。
方法简介:
实验室分离的兔心脏微血管内皮细胞采用胶原酶-中性蛋白酶混合消化法结合密度梯度离心法、后通过内皮细胞培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的兔心脏微血管内皮细胞经CD31荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品:
sCD30LELISAKit
大鼠C型钠尿肽(CNP)elisa分析检测试剂盒
CNP ELISA Kit
人庚型肝炎病毒抗体(IgM)elisa分析检测试剂盒
HumanHepatitisGvirusantibodyIgMELISAKit
小鼠抗内膜抗体(EMAb)elisa检测试剂盒
大鼠毒蕈碱型胆碱受体M1(CHRM1)elisa检测试剂盒
细胞血红素氧合酶-2(HEME OXYGENASE-2)活性荧光定量检测试剂盒
人大肠癌专一抗原4(CCSA-4)elisa分析检测试剂盒
艾滋病病毒EP1抗体
HIVEP1
芳香乙酰胺脱乙酰基酶样蛋白4抗体
AADACL4
大鼠脑钠肽前体N末端片段(NT-proBNP)elisa检测试剂盒
线粒体呼吸链复合物V(F0F1-ATP酶/ATP合成酶)
髓过氧化物酶MPO测试盒 100管/48样 比色法
通用型鸭肠炎沙门氏菌(SE)基因检测试剂盒
木瓜酶抗体
Papain
钙营养蛋白1/钙结合蛋白8抗体
Calneuron 1
凋亡相关蛋白5抗体 Anti-TFAR19/PDCD5
原钙粘蛋白β7抗体 Anti-PCDHB7
早老素蛋白-2抗体 Anti-presenilin 2/PS-2
多重表皮生长因子样蛋白4抗体 Anti-Slit1/MEGF4
碱性磷酸酶(AP)标记的小鼠抗兔IgM
兔心脏微血管内皮细胞Mouse Anti-Rabbit IgM / AP
信号转导接头蛋白2抗体
KIAA1495; Leucine-rich repeat and calponin homology domain-containing protein 2; LRCH2; LRCH2_HUMAN.
兔胸腺上皮细胞
兔胰腺导管上皮细胞
ZR-75-30人乳腺癌细胞
HEY A8人卵巢癌细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。