
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
兔胃黏膜上皮细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
胃
生长特性
贴壁
细胞形态
上皮细胞样
分类
兔原代细胞
货号
A01X2048
用途
仅供科研实验
培养信息:
包被条件:鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:上皮细胞样
传代特性:可传1-2代
消化液:0.25%胰蛋白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔胃黏膜上皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞简介:
兔胃黏膜上皮细胞分离自胃黏膜组织;胃黏膜柔软,活体呈橘红色。胃空虚时形成许多皱襞,充盈时变平坦。幽门处的黏膜形成环形皱襞,突向腔内称幽门瓣。胃黏膜可分为三层,即上皮层(单层柱状上皮)、固有层(由结缔组织构成、含有大量的胃腺)和黏膜肌层(为薄层平滑肌、排列成内环外纵)。胃黏膜上皮细胞源自胃黏膜的上皮层,细胞为单层柱状上皮,排列整齐,能分泌黏液覆盖于胃黏膜的表面,防止胃酸和胃蛋白酶对胃黏膜的损害。体外培养胃黏膜上皮细胞为研究细胞功能及致病因子、、对细胞的损伤、保护和功能调控提供了简单而的模型。
方法简介:
实验室分离的兔胃黏膜上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的兔胃黏膜上皮细胞经Cytokeratin-18荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品:
牛心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)elisa分析检测试剂盒
大鼠碳酸酐酶Ⅱ(CA2)elisa检测试剂盒
血液氧化应激活性氧(ROS)鲁米诺化学发光法定量检测试剂盒
豚鼠过氧化脂质/乳过氧化物酶(LPO)elisa检测试剂盒
位素标记放射活性TCA检测试剂盒
小鼠抗肌内膜抗体IgA(EMA IgA)elisa分析检测试剂盒
大鼠蛋白激酶B(PKB)elisa分析检测试剂盒
组织半胱-2(CASPASE-2)活性比色法定量检测试剂盒
人成纤维细胞生长因子6(FGF6)elisa检测试剂盒
源盒转录因子LMX1A抗体 LMX1A
唾液过氧化物酶LPO抗体 Lactoperoxidase
RNA结合蛋白33抗体 RBM33
SCE1蛋白抗体 SCE1
6号染色体开放阅读框72抗体 C6orf72
Acinus抗体 Acinus
甲状旁腺抗体 parathyroid hormone
碱性核蛋白2(锌指蛋白basonuclin2)抗体 BNC2
胰高血糖素样肽2受体抗体 GLP2R
抑癌蛋白5抗体 ST5
多腺苷二磷酸多聚酶PARP14抗体 PARP14
泛素硫酯酶L3抗体 UCHL3
GalNAc-TL1蛋白抗体 GALNTL1
G蛋白结合蛋白7抗体 GBP7
末端脱氧核苷酸转移酶抗体 DNTT
嘌呤核苷磷酸化酶抗体 Nucleoside phosphorylase
内凝胶法定量检测试剂盒
兔胃黏膜上皮细胞人含SET域4(setd4)elisa分析检测试剂盒
大鼠环磷酸腺苷(cAMP)elisa检测试剂盒
ZFP36L2; BRF2; Butyrate response factor 2; EGF response factor 2; ERF 2; ERF2; Protein TIS11D; RNF162C; zinc finger protein 36, C3H type like 2; BRF2_HUMAN.
兔胃平滑肌细胞
兔脂肪细胞
U266人骨髓瘤细胞
HEL人红白细胞白血病细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。