
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
兔脑膜细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
脑膜
生长特性
贴壁
细胞形态
成纤维细胞样
分类
兔原代细胞
货号
A01X2192
用途
仅供科研实验
培养信息:
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传2-3代
消化液:0.25%胰蛋白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔脑膜细胞体外培养周期有限;建议使用配套的生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞简介:
兔脑膜细胞分离自脑膜组织;脑膜是颅骨与脑间的隔膜,一共有三层,由外向内为硬脑膜、蛛网膜和软脑膜。脑膜细胞围绕着大脑,参与神经系统的正常发育,能稳定脑软膜表面的细胞外基质、组织放射状胶质细胞网络和小脑皮层分层结构。
方法简介:
实验室分离的兔脑膜细胞采用胰蛋白酶消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的兔脑膜细胞经Vimentin荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品:
PTHELISAKit
内皮细胞凋亡E蛋白CE1抗体
HYI
禽脑脊髓炎病毒AEV抗体
AEV polyprotein
小鼠高半胱氨酸(Hcy)elisa检测试剂盒
大鼠γ谷氨酸-半胱氨酸合成酶(γ-GCS)elisa检测试剂盒
体液甘油三酯(triglyceride)含量酶连续循环反应比色法
人Seryl- tRNA合成酶,细胞质(SARS/SERS)elisa检测试剂盒
减数分裂缺陷蛋白1抗体
MEI-1
1号染色体开放阅读框122抗体
C1orf122
肿瘤坏死因子配体超家族成员7抗体 Anti-CD70/CD27L/TNFSF7
丝氨酸蛋白激酶1抗体 Anti-Rad53/SPK1
跨膜硫酸软骨素蛋白聚糖C抗体 Anti-Neuroglycan C
磷酸化波形蛋白抗体 Anti-Phospho-Vimentin(Ser82)
早期生长应答蛋白1靶向蛋白1抗体
TOE1
羊毛甾醇14α-去甲基化酶蛋白抗体
CYP51A1
基质细胞衍生因子1抗体 Anti-SDF-1/CXCL12
骨桥蛋白抗体(分泌型磷蛋白1) Anti-OPN/BSP
一种肿瘤抑制基因抗体(C端) Anti-PTEN/MMAC1(CT)
微管蛋白α/Tubulin α抗体 Anti-Tubulin-alpha 1
APC标记大鼠IgG(型对照)
兔脑膜细胞Rat IgG / APC
钾/钠超极化激活环核苷酸门控通道蛋白2抗体
AHUS3; ARMD13; C3b INA; C3b inactivator; C3B/C4B inactivator; C3BINA; CFAI_HUMAN; Cfi; Complement component I; Complement control protein factor I; Complement factor I; Complement factor I heavy chain; Complement factor I light chain; F1; factor I; FactorI; FI; I factor; IF; KAF; Konglutinogen activating factor; Light chain of factor I; OTTHUMP00000219728; OTTHUMP00000221928
兔脑微血管内皮细胞
小鼠腹腔巨噬细胞
SK-N-BE(2)人神经母细胞瘤细胞
HC11小鼠乳腺上皮细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。