
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
兔结肠平滑肌细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
结肠
生长特性
贴壁
细胞形态
成纤维细胞样
分类
兔原代细胞
货号
A01X2056
用途
仅供科研实验
培养信息:
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传5代左右;3代以内状态佳
消化液:0.25%胰蛋白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔结肠平滑肌细胞体外培养周期有限;建议使用配套的生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞简介:
兔结肠平滑肌细胞分离自结肠组织;结肠在右髂窝内续于盲肠,在第3骶椎平面连接直肠。结肠分升结肠、横结肠、降结肠和乙状结肠4部分,大部分固定于腹后壁,结肠的排列酷似英文字母“M”,将小肠包围在内。结肠横切面由内到外依次为:黏膜(上皮层、固有层、黏膜肌层),黏膜下层(疏松结缔组织),肌层(内环形、外纵行两层平滑肌),外膜(纤维膜或浆膜)。结肠平滑肌细胞主要分布于黏膜肌层和肌层的内环形、外纵行平滑肌;结肠运动少而缓慢,对刺激的反应也较迟缓。结肠平滑肌在食物消化与吸收、肠道运动和物质分泌、诱发全身炎症反应以及细胞内信号转导途径等研究中起着重要的作用。结肠平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。结肠平滑肌运动活性受到神经递质、胃肠和等因素的调节。随着现代胃肠动力学研究的进展,对胃肠运动的研究已从器官、组织水平发展到细胞、分子水平,要求在胃肠道单个平滑肌细胞标本上来完成各种电生理、药理和分子生物学等实验。体外培养细胞,由于影响因素单一,是研究细胞功能以及相应的细胞信号转导机制的基础。
方法简介:
实验室分离的兔结肠平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的兔结肠平滑肌细胞经α-SMA荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品:
大鼠胃动素受体(MTLR)elisa检测试剂盒
A型流感病毒非结构蛋白1抗体
Influenza A Nonstructural Protein 1
锚蛋白重复结构域蛋白26抗体
ANKRD26
小鼠热休克因子1(HSF1)elisa检测试剂盒
大鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)elisa分析检测试剂盒
体液总胆汁酸酶循环比色法定量检测试剂盒
人P0蛋白抗体(IgM)elisa分析检测试剂盒
MOSPD3蛋白抗体
MOSPD3
1号染色体开放阅读框95抗体
C1ORF95
转录因子E3 Anti-TFE3
核糖体结合蛋白1抗体 Anti-RRBP1
核仁蛋白3抗体 Anti-Nucleolar protein 3/Apoptosis repressor with CARD
维生素D3受体抗体 Anti-Vitamin D Receptor/VDR
辣椒素受体样蛋白1抗体
TRPV2
ATP依赖RNA解旋酶DDX47抗体
DDX47
突触结合蛋白相关基因2抗体 Anti-synaptotagmin-2
嗅球蛋白1抗体 Anti-OLFM1/Noelin
磷酸化P73肿瘤抑制基因抗体 Anti-Phospho-p73(Tyr99)
BTRC2蛋白抗体 Anti-BTRC2/beta TRCP2
大鼠孤腓肽(OFQ/N)elisa分析检测试剂盒
兔结肠平滑肌细胞OFQ/N ELISA Kit
豚鼠球蛋白G(IgG)elisa分析检测试剂盒
Interleukin-10 Receptor; CD210; CDW210A; CDw210a; CDw210a antigen; HIL 10R; HIL10R; IL 10R 1; IL 10R A; IL 10R; IL10RA; IL 10R1; IL10R; IL10R1; Interleukin 10 receptor alpha; Interleukin 10 receptor alpha chain; I10R1_HUMAN; Interleukin-10 receptor subunit alpha; IL-10 receptor subunit alpha; IL-10R subunit alpha; IL-10RA; Interleukin-10 receptor bunit 1; IL-10R subunit 1; IL-10R1.
兔晶状体上皮细胞
小鼠肝卵圆细胞
SK-BR-3人乳腺癌细胞
H9C2大鼠心肌细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。