产品名称
兔角膜基质细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
角膜组织
生长特性
贴壁
细胞形态
成纤维细胞样
分类
兔原代细胞
货号
A01X2217
用途
仅供科研实验
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
细胞简介：
兔角膜基质细胞分离自眼角膜组织；角膜位于眼球前壁的一层透明膜，约占纤维膜的前1/6，从后面看角膜呈正圆形，从前面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不尽相同，中央部薄。角膜有十分敏感的神经末梢，如有外物接触角膜，眼睑便会不由自主地合上以保护眼睛。为了保持透明，角膜并没有血管，透过外界空气、泪液及房水获取养份及氧气。角膜分为五层，由前向后依次为：上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层、内皮细胞层。角膜基质层是角膜的主要组成部分，占据角膜厚度的90%，由角膜基质细胞、胶原纤维和细胞外基质构成。角膜基质层缺损的修复主要由角膜基质细胞的增殖及分泌细胞外基质完成。角膜基质层具有结构规整，透明度高的特点，正常情况下角膜基质细胞分泌组成基质层的成分，维持角膜的透明度，此细胞对于角膜损伤的修复具有重要意义。角膜基质细胞，存在于角膜基质层中，在正常情况下，处于静止状态。但当角膜损伤时，不同上皮来源的因子及环境信号，将影响角膜基质细胞的应答反应，决定着角膜能否完全被修复。
方法简介：
公司实验室分离的兔角膜基质细胞采用混合胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的兔角膜基质细胞经Vimentin荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
①动物处理：用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡，然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒（浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内，影响培养）后迅速置于的培养皿中，带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材：将乳鼠俯卧位，用乙醇进行一次背部，再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤，剖开腹部，取出肝脏放入另一培养皿中，除去其他连带组织，用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次，每次1~2 ml，洗去血污，将废液弃于废液杯中。
③组织分离：用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除，然后将肝组织反复剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小块后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次，弃废液。
④接种：用吸管加2滴小牛血清，小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液，然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地（组织块之间相距约0.5 cm左右）排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。
⑤培养：将培养瓶慢慢翻转，使瓶底向上，加入1~2 ml培养液，拧紧瓶盖，做好标记，置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时，待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后，再缓慢翻转培养瓶（尽量注意不要使组织块漂浮起来），另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块，将瓶盖调整在略微松弛状态，继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察：细胞接种后一般几个小时内即可贴壁，并开始生长。如果无污染且细胞生长良好，可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色，此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞，这时可进行传代培养。
原代细胞步骤：
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织，剔除包膜及坏死组织，无菌PBS清洗3-5次；切成约1mm3组织块；
2. 加入2mmol 的 EDTA，摇匀后放置冰上约 30-60min；
3. 离心，并加入胶原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期间，置于37°培养箱。每15min摇晃一次，消化时间根据肿瘤组织来定，约1-2h；
5. 待大部分组织块消化成透明状时，用 40μm 的细胞滤网过滤细胞，收集；
6. 用培养基重悬，置于培养箱培养。
公司正在出售的产品：
CD44ELISAKit
组织相容性复合体2DOA抗体
HLA-DOA
神经细胞分化相关蛋白AHNAK抗体
AHNAK
小鼠肺部活化调节趋化因子(PARC/CCL18)elisa分析检测试剂盒
大鼠α2-HS糖蛋白(AHSG)elisa检测试剂盒
葡萄糖一6一磷酸脱氢酶（G6PD）定量检测试剂盒
人NADPH氧化酶3(NOX3/MOX2)elisa分析检测试剂盒
黑色素瘤相关抗原2抗体
MAGEA2
无精症缺失相关蛋白1抗体
DAZAP1
电压门控钠通道SCN3α蛋白/Na+ CP type IIIα抗体 Anti-SCN3A
Rap2A抗体 Anti-Rap2A
神经钙传感蛋白1抗体 Anti-NCS1/Frequenin
肿瘤/睾丸抗原12家族2抗体 Anti-XAGE2
互养蛋白1,2,3抗体
Syntrophin-1+2+3
黑色素瘤抑制活性蛋白2抗体
MIA2
SAMD7蛋白抗体 Anti-SAMD7
磷脂酰肌醇激酶p85β抗体 Anti-PI 3 Kinase p85 beta
蛋白磷酸酶-1B抗体 Anti-PTP1B
凝血调节蛋白/血栓调节素抗体 Anti-Thrombomodulin/CD141
Cy5.5标记羊IgG（型对照)
兔角膜基质细胞Goat IgG / Cy5.5
G蛋白偶联受体64抗体
UB2E1_HUMAN; UbcH6; UBE2E1; Ubiquitin carrier protein E1; Ubiquitin-conjugating enzyme E2 E1; Ubiquitin-protein ligase E1.
兔角膜内皮细胞
小鼠肝星状细胞
SGC-7901人胃癌细胞
GT1-1小鼠垂体瘤细胞