
细胞简介:

兔肺动脉内皮细胞分离自肺动脉组织;肺动脉亦称肺动脉干。在呼吸空气的脊椎动物中,把静脉血由心脏导向肺脏的动脉。肺动脉起于右心室,在主动脉之前向左上后方斜行。细胞呈单层多角形铺路石状分布;该细胞在维持血管内外的动态平衡、合成和分泌细胞因子和介质、维持凝血和纤溶的动态平衡中起重要作用。肺动脉内皮细胞呈单层多角形铺路石状分布,该细胞在维持血管内外的动态平衡、合成和分泌细胞因子和介质、维持凝血和纤溶的动态平衡中起重要作用。
组织来源 |
产品规格 |
货号 |
用途 |
肺动脉 |
5×105cells/T25细胞培养瓶 |
A01X2007 |
仅供科研研究实验 |
培养信息:
包被条件:PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:内皮细胞样
传代特性:可传2-3代
消化液:0.25%胰蛋白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔肺动脉内皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
方法简介:
实验室分离的兔肺动脉内皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的兔肺动脉内皮细胞经CD31荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
实验具体步骤:

(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净;
(3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中;
(4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min;
(5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
(6)种植组织块:将上述组织使用2X双抗冰冷PBS洗涤3次,每次5min,然后使用完全培养基(含有1X双抗)洗涤一次。经过的心脏破碎组织块经过离心后,可以用细头
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的
盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);

(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
(8)贴壁细胞传代:当单个细胞从组织块爬出面积在组织块3-5倍,进行传代,此时可以使用0.25% or 1/3 0.25% 胰蛋白酶消化组织块爬出的细胞,消化时间根据正常细胞消化时间即可,当然可以在消化过程中不断管擦爬出细胞的皱缩情况,一旦达到消化完成(皱缩细胞≥70%)即可使用完全培养基终止消化。在吹打单个细胞时候,一定要轻柔/缓慢,不能吹打到组织块,如果组织块掉下来,大概率是不会再贴壁成功啦。根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;
(9)鉴定:细胞在传代至代、第五代、第十代时候可以将部分细胞进行鉴定,鉴定办法包括:RNA-seq、western blot、qRT-PCR、RT-PCR、IF、流式细胞术等。实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法
组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。
二、实体组织材料的分离方法
对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
公司正在出售的产品:
石蜡切片特恩布尔(TURNBULL)铁(二价)染色试剂盒
血栓溶解活力(THROMBOLYTIC)体外检测试剂盒
大鼠组织多肽抗原(TPA)elisa检测试剂盒免费代测
体液糖胺多糖(GAG)总含量阿尔新蓝(alcian blue)比色法定量检测试剂盒
小鼠白介素31(IL31)elisa检测试剂盒
小鼠白细胞介素12(IL-12/P70)elisa检测试剂盒
大鼠5羟基吲哚乙酸(5-HIAA)elisa分析检测试剂盒
COLLAGEN I蛋白表达ELISA定量检测试剂盒
人17-酮皮质类固醇(17-KS)elisa检测试剂盒
嗅觉受体52E4抗体 OR52E4
血红素氧合酶 1抗体 Heme Oxygenase 1
蛋白激酶C theta抗体 PKC theta
蛋白质磷酸酶2调节亚基1B单克隆抗体 PPP2R1B
FAM59B蛋白抗体 FAM59B
FITC标记人CD105单克隆抗体 human CD105/FITC
磷酸化周期素C抗体 phospho-Cyclin C (Ser275)
磷酯酶Cγ1抗体 PLCG1
20号染色体开放阅读框106抗体 C20orf106
3号染色体开放阅读框49抗体 C3orf49
肌球蛋白3A抗体 MYO3A
激活STAT蛋白抑制因子4抗体 PIAS4/PIASy
PRDM12单克隆抗体 PRDM12
RASSF5抗体 RASSF5
丝氨酸/苏氨酸SRp20抗体 SFRS3
碳酸酐酶7抗体 CA7
植物全钾含量测试盒
兔肺动脉内皮细胞10倍酵母菌SD-GAL/RAF培养基
鱼葡萄糖-6-磷酸酶(G6PC)elisa检测试剂盒免费代测
BAL; Bile salt-stimulated lipase; BSDL; BSSL; Bucelipase; Carboxyl ester lipase (bile salt stimulated lipase); Carboxyl ester lipase; CEase; CEL; CELL; Cholesterol esterase; FAP; FAPP; Fetoacinar pancreatic protein; LIPA; Lysophospholipase, pancreatic; MODY8. Pancreatic lysophospholipase; Sterol esterase antibody; CEL_HUMAN.
兔肺动脉平滑肌细胞
小鼠肌腱细胞
NOZ人胆囊癌细胞
EBC-1人非小细胞肺癌细胞