
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
人肾小球内皮细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
肾组织
生长特性
贴壁
细胞形态
内皮细胞样
分类
人原代细胞
货号
A01X1330
用途
仅供科研实验
培养信息:
包被条件 PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
人肾小球内皮细胞分离自肾组织;肾脏是机体的重要器官,它的基本功能是**尿液,借以体内代谢产物及某些废物、毒物,同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质,如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、等,以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有功能,**肾素、促红细胞**素、活性维生素D3、前列腺素、激肽等,又为机体部分的降解场所和肾外的靶器官。肾脏的这些功能,保证了机体内环境的稳定,使新陈代谢得以正常进行。肾小球是肾元中的用于将血液过滤**原尿的一团毛细血丛,被鲍氏囊所包裹,是尿液形成的重要构造。血液经由入球小动脉进入肾小球。肾小球内的微血管不像其他微血管,汇流入静脉,而是流入出球小动脉。在肾小球内,微血管受到高压,而加速了超滤作用(hyperfiltration)的进行。微血管中的血液经由超滤作用之后,形成滤液,渗入鲍氏囊内。肾小球与鲍氏囊合称为肾小体,肾小球的过滤速率便称为肾小球过滤率。肾小球内皮细胞是一类特殊微血管类型的细胞。细胞为圆形、多角形,单层贴壁生长;细胞质丰富,细胞核为圆形或卵圆形。肾小球内皮细胞被覆于肾小球壁腔侧,与血流直接接触,是肾小球滤过膜的道屏障,可粘附和白细胞,修复基底膜,并有抗凝、抗血栓的作用;所以,体外培养的肾小球内皮细胞在学和病理生理学领域中具有重要的研究价值。
方法简介:
公司实验室分离的人肾小球内皮细胞采用先机械研磨过不锈钢网筛分离得到肾小球、后用胶原酶消化,结合内皮细胞培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人肾小球内皮细胞经CD31荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品:
冰冻切片结缔组织(CONNECTIVE TISSUE)改良格莫瑞三色(MGT)染色试剂盒
黑色素瘤相关抗原E2/肝细胞癌相关蛋白3抗体
MAGEE2/HCA3
羰基还原酶2抗体
DCXR
过氧化物酶POD测试盒测植物 100管/48样 比色法
冰冻切片荧光显微镜直接检测试剂盒(含荧光一抗)
小鼠催乳素释放(PRH)elisa检测试剂盒
大鼠GATA结合蛋白4(GATA4)elisa检测试剂盒
异构核糖核蛋白E1抗体
PCBP1
单纯疱疹病毒1型DNA聚合酶催化亚单位抗体
HHV11 DNA polymerase catalytic subunit
磷酸化转化生长因子β活化激酶1 Anti-Phospho-TAK1(Thr184/187)
p21激活激酶4抗体 Anti-PAK4
磷酸化髓鞘转录因子1激酶抗体 Anti-phospho-PKMYT1(Thr495)
磷酸化嗜中性粒细胞胞浆因子1抗体 Anti-phospho-NCF1/p47 phox(Ser359)
PE-Cy5.5标记的兔抗豚鼠IgG H&L
Rabbit Anti-Guinea Pig IgG H&L / PE-Cy5.5
肽聚糖识别蛋白1抗体
PGRPS
锌指蛋白46抗体 Anti-ZBTB25/ZNF46
载脂蛋白AI调节蛋白1抗体 Anti-NR2F2/NR2F1
G蛋白信号转导调节因子2抗体 Anti-RGS2
脑质膜单胺转运蛋白PMAT抗体 Anti-SLC29A4
大鼠c-fos elisa分析检测试剂盒
人肾小球内皮细胞Rat c-fos ELISA Kit
人高敏甲状腺素(u-T4)elisa分析检测试剂盒
C-C motif chemokine 7; CCL7; CCL7_HUMAN; Chemokine CC Motif Ligand 7; FIC; MARC; MCP-3; MCP3; Monocyte chemoattractant protein 3; Monocyte chemotactic protein 3; NC28; RP23-350G1.4; SCYA6; SCYA7; Small inducible cytokine A7; Small-inducible cytokine A7.
人肾小球系膜细胞
小鼠膀胱基质成纤维细胞
MGC-803人胃癌细胞
COLO-320人结肠癌细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。