
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
人软骨细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
软骨组织
生长特性
贴壁
细胞形态
梭形、多角形
分类
人原代细胞
货号
A01X1419
用途
仅供科研实验
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2~3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 梭形、多角形
传代特性 可传5代左右;3代以内状态佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
人软骨细胞分离自软骨组织;软骨组织由软骨细胞、基质及纤维构成。软骨组织再生能力强,这些增生的幼稚细胞形似纤维母细胞,以后逐渐变为软骨母细胞,并形成软骨基质,细胞被埋在软骨陷窝内而变为静止的软骨细胞。根据软骨组织内所含纤维成分的不同,可将软骨分为透明软骨、弹性软骨和纤维软骨三种,其中以透明软骨的分布较广,结构也较典型。软骨细胞(chondrocyte)位于软骨陷窝内。幼稚的软骨细胞位于软骨组织的表层,单个分布,体积较小,呈椭圆形,长轴与软骨表面平行,越向深层的软骨细胞体积之间增大呈圆形,细胞核圆形或卵圆形,染色浅,细胞质弱嗜碱性,常见数量不一的脂滴。成熟的软骨细胞多2-8个成群分布于软骨陷窝内,这些软骨细胞由同一个母细胞分裂增殖而成,称为同源细胞群。电镜下,软骨细胞有突起和皱褶,细胞质内有大量的粗面内质网和发达的高尔基复合体及少量的线粒体。在组织切片中,软骨细胞收缩为不规则形,在软骨囊和细胞之间出现较大的腔隙。体外培养的软骨细胞对于研究其生理功能、作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。
方法简介:
公司实验室分离的人软骨细胞采用胶原酶-中性蛋白酶联合消化制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人软骨细胞经Ⅱ型胶原蛋白荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品:
石蜡切片组织INSULIN 蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
鱼γ干扰素(IFN-γ)elisa检测试剂盒
大鼠前列腺素E1(PGE1)elisa检测试剂盒
硝酸盐肉汤
兔基质金属蛋白酶1(MMP-1)elisa检测试剂盒
总蛋白提取试剂盒100T
冰冻切片胶原纤维(MASSON)染色试剂盒
小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体δ(PPARδ)elisa检测试剂盒
大鼠白介素2受体α(IL2Rα)elisa检测试剂盒
E3连接酶蛋白ARIH2抗体 ARIH2
ETV3L蛋白抗体 ETV3L
磷酸化驱动蛋白样蛋白1抗体 phospho-Eg5 (Thr926)
磷酸化细胞间粘附分子1(CD54)抗体 phospho-ICAM1 (Tyr512)
超氧化物歧化酶2重组兔单克隆抗体 SOD2
脆性X相关蛋白样2抗体 FXR2
锌指蛋白192抗体 ZFP192
锌指蛋白567抗体 ZNF567
PE-Cy5标记小鼠CD86单克隆抗体 mouse CD86/PE-Cy5
PE标记人CD30单克隆抗体 human CD30/PE
肾功能相关抗原1抗体 KAAG1
视锥视杆相关蛋白CORD2抗体 CORD2/OTX3
红细胞膜条带4.1蛋白抗体 EPB41
环指蛋白8抗体 RNF8
转铁蛋白(内参)单克隆抗体 Transferrin(Serum Loading Control)
14号染色体开放阅读框146抗体 LRFN5/C14orf146
人肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)elisa检测试剂盒
人软骨细胞组织肌酸激酶(CK)总活性比色法定量检测试剂盒
小鼠凝血因子VIIIa轻链(F8aLC)elisa检测试剂盒
TEN3_HUMAN; Teneurin-3; Ten-3; Protein Odd Oz/ten-m homolog 3; Tenascin-M3; Ten-m3; Teneurin transmembrane protein 3; KIAA1455; ODZ3; TNM3;
人视网膜色素上皮细胞
小鼠胚胎成纤维细胞
MDA-MB-468人乳腺癌细胞
COLO 829人黑素瘤细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。