
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
人卵巢微血管内皮细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
卵巢组织
生长特性
贴壁
细胞形态
内皮细胞样
分类
人原代细胞
货号
A01X1390
用途
仅供科研实验
培养信息:
包被条件 PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传3代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
人卵巢微血管内皮细胞分离自卵巢组织;卵巢是雌性动物的生殖器官,卵巢的功能是产生卵以及类固醇。卵巢的位置与睾丸相同,仅左侧发育(右侧已退化),呈葡萄状,均为处于不同发育时期的卵泡,卵泡呈黄色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小与年龄和产卵期有关。大多数脊椎动物有两个卵巢,但是部分鱼类的两个卵巢融合为单个结构,而所有鸟类只有左侧卵巢有机能。卵巢是位于两侧的一对卵圆形的生殖器官,它的外表有一层上皮组织,其下方有薄层的结缔组织。卵巢的内部结构可分为皮质和髓质。皮质位于卵巢的周围部分,主要由卵泡和结缔组织构成;髓质位于中央,由疏松结缔组织构成,其中有许多血管、管和神经。微血管又称。分布于各种组织和细胞间的微细的血管。介于微动脉和微静脉之间。平均直径7~9微米,数量极多,成网状分布。管壁由一层内皮细胞及一薄层基膜组成,厚约0.5微米。基膜外面有薄层结缔组织,其中有纤维细胞、巨噬细胞和周细胞等。细的微血管由一个内皮细胞围成管腔,较粗的微血管由2~3个内皮细胞围成。分布于肌肉组织、神经组织和结缔组织中的微血管,内皮细胞间为缝隙连接(缝隙宽150埃),称连续微血管。血管内皮细胞在器官和组织的结构和功能上起着非常重要的作用。并与多种的发生与发展有关。近年来血管内皮细胞在炎症、休克等一系列病理生理改变中的重要性愈来愈受到人们的重视。研究发现,不同来源的内皮细胞在生物学特征、结构和功能等方面均存在一定差别,而同是微血管内皮细胞,它们又存在器官和组织的特异性。
方法简介:
公司实验室分离的人卵巢微血管内皮细胞采用胶原酶-中性蛋白酶混合消化法结合密度梯度离心法、后通过内皮细胞培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人卵巢微血管内皮细胞经CD31荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品:
VB12ELISAKit
大鼠的牛血清白蛋白残留检测elisa分析检测试剂盒
Rat rudimental bovine serum albumin check-up ELISA Kit
山羊白介素12(IL-12/P40)elisa分析检测试剂盒
IL-12/P40ELISAKIT
大鼠PDGFβ基因甲基化检测试剂盒
γ干扰素(IFNG)elisa分析检测试剂盒
BCA 蛋白定量试剂盒500T
小鼠黑色素瘤抗原家族A1(MAGEA1)elisa检测试剂盒
孕/孕酮(PROG)elisa分析检测试剂盒
PROG ELISA kit
人胆酸(Cholic acid)elisa分析检测试剂盒
HumanCholicacidELISAKit
DNA上样缓冲液6x 5ml
小鼠巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)elisa检测试剂盒
牛丙二酸单酰辅酶A(malonyl CoA)elisa检测试剂盒
组织单胺氧化酶(MAO)总活性化学发光法定量检测试剂盒
肌球蛋白重链9抗体
MYH9
3号染色体开放阅读框20抗体
C3orf20
Tudor结构域蛋白TDRD3抗体 Anti-TDRD3
G蛋白偶联受体RAB23抗体 Anti-RAB23
分化相关基因NDRG1抗体 Anti-NDRG1/Cap43
干细胞生长因子抗体 Anti-SCF
PE-Cy7标记的兔抗人IgM
人卵巢微血管内皮细胞Rabbit Anti-Human IgM / PE-Cy7
猪蓝耳病病毒抗体
C7orf12; CAS1 domain-containing protein 1; Casd1; CASD1_HUMAN; FLJ21213; FLJ21879; FLJ41901; NBLA04196.
人脉络膜微血管内皮细胞
小鼠腮腺细胞
LNCaP clone FGC人前列腺癌细胞
ChaGo-K-1 肺支气管癌
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。