
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
大鼠支气管上皮细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
支气管组织
生长特性
贴壁
细胞形态
上皮细胞样
分类
大鼠原代细胞
货号
A01X1522
用途
仅供科研实验
培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
大鼠支气管上皮细胞分离自支气管组织;支气管(Bronchi),是指由气管分出的各级分枝,由气管分出的支气管,即左、右主支气管。左主支气管与右主支气管相比较,前者较细长,走向倾斜;后者较粗短,走向较前者略直,所以经气管堕入的异物多进入右主支气管。支气管和气管还有以区别就是,气管是以“C”型的气管软骨为支架,而支气管不是。支气管上皮是气道与外界环境接触的道防线,不仅是各种病原体、炎症介质作用的靶细胞,还作为效应细胞合成、释放多种炎性介质和细胞因子,从而参与气道炎症及反应。支气管上皮细胞在**、慢性阻塞性肺、肺癌、肺囊性纤维化以及一些感染性呼吸道的发病机制中均起着重要的作用。体外培养的原代支气管上皮细胞因与体内组织在形态结构和功能活动上存在很大的相似性,因此,在基础及临床研究中极为重要。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠支气管上皮细胞采用-中性蛋白酶混合消化法结合机械刮刷并通过上皮细胞培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠支气管上皮细胞经PCK荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品:
纯化人体RUNX3基因重组表达载体(pCMV5-RUNX3)
体液氧化酶活性比色法定量检测试剂盒
人α-内肽(α-EP)elisa检测试剂盒免费代测
大鼠白介素20(IL-20)elisa分析检测试剂盒
小鼠突触融合蛋白2(STX2)elisa检测试剂盒
磷酸化外纺锤体极样蛋白1抗体 Anti-phospho-Separase (Ser1073)
Rho相关蛋白激酶1抗体 Anti-ROCK1
核仁蛋白8抗体 Anti-NOL8
锌指蛋白185抗体 Anti-ZNF185
重组葡萄球菌蛋白A抗体 Protein A
转化生长因子β1抗体 TGF Beta 1
谷氨酸脱羧酶-65抗体(C端) GAD65
果蝇RhoGAP92B抗体 RhoGAP92B
MDM2样P53蛋白结合抗体 MDMX
NADH氧化还原酶辅酶4样蛋白抗体 NDUFA4L2
溶血磷脂酰基转移酶抗体 AGPAT1
乳腺癌雌调控蛋白GREB1抗体 GREB1
CD6抗体 CD6
C-肽抗体 C Peptide
磷酸化FMS样激酶3 Phospho-FLT3 (Tyr842)
磷酸化沉默调节蛋白1抗体 Phospho-SIRT1 (Ser47)
白介素3受体a(CD123)链抗体 IL3RA
胞浆蛋白SH3GL3抗体 SH3GL3
细丝蛋白2抗体 FLNC
心房钠尿因子/心钠素/心房利钠肽/ANP单克隆抗体 Atrial natriuretic factor
小鼠骨涎蛋白(BSP)elisa检测试剂盒免费代测
大鼠支气管上皮细胞组织蛋白提取试剂盒100T
ERK蛋白表达ELISA定量检测试剂盒
Dimethylaniline monooxygenase [N oxide forming] 3; Dimethylaniline monooxygenase [N-oxide-forming] 3; Dimethylaniline monooxygenase 3; Dimethylaniline oxidase 3; dJ127D3.1; Flavin containing monooxygenase 3; FMO 3; FMO form 2; FMO II; FMO3; FMO3_HUMAN; FMOII; Hepatic flavin containing monooxygenase 3; Hepatic flavin-containing monooxygenase 3; MGC34400; TMAU; Trimethylamine monooxygenase.
大鼠脂肪干细胞
小鼠输卵管上皮细胞
HS683人脑胶质瘤细胞
C3H/10T1/2 Clone8 小鼠胚胎成纤维细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。