
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
大鼠肾小管上皮细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
肾组织
生长特性
贴壁
细胞形态
上皮细胞样
分类
大鼠原代细胞
货号
A01X1587
用途
仅供科研实验
培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
大鼠肾小管上皮细胞分离自肾组织;肾脏是机体的重要器官,它的基本功能是**尿液,借以体内代谢产物及某些废物、毒物,同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质,如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、等,以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有功能,**肾素、促红细胞**素、活性维生素D3、前列腺素、激肽等,又为机体部分的降解场所和肾外的靶器官。肾脏的这些功能,保证了机体内环境的稳定,使新陈代谢得以正常进行。肾小管是机体肾脏器官上与肾小囊壁层相连的一条细长上皮性小管,具有重吸收(reabsorption)和排泌作用。肾小管按不同的形态结构、分布位置和功能分成近端小管、髓袢和远端小管三部分;近端小管可分为直部和曲部,曲部也称为近曲小管,位于皮质迷路内,于肾小体附近高度蟠曲;远端小管曲部也称为远曲小管,位于皮质迷路内。肾小管上皮细胞是肾小管外面的一层细胞,肾小管上皮细胞的分离、培养是研究肾脏的一项重要技术,目前该细胞分离方法有酶分离法、化学分离法筛网分离法、显微解剖分离法、流式细胞仪分离法等。肾小管上皮细胞主要功能:①肾小管上皮细胞重吸收原尿中几乎全部的葡萄糖和氨基酸;②排泌非营养物质进入终尿;③细胞能分泌炎症介质如细胞因子和趋化因子,通过产生IL-8或直接趋化白细胞参与急性炎症反应;④移植肾炎症和新月体肾炎中PTEpiC表达IL-2R和MHC-Ⅱ类抗原,这说明肾小管上皮细胞参与肾损伤的发生。随着对肾间质纤维化机制研究的日渐加深,肾小管上皮细胞(RTECs)在其中的作用日益被人们重视。因此,提供良好的肾小管上皮细胞模型,在肾小管间质的发病机制和筛选的研究中是非常重要的。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠肾小管上皮细胞采用先机械研磨过不锈钢网筛分离得到肾小管、后用胶原酶消化,结合上皮细胞培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠肾小管上皮细胞经Cytokeratin-18荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品:
猪骨成型蛋白7(BMP7)elisa分析检测试剂盒
肿瘤坏死因子C/β抗体
Lymphotoxin Beta
细胞色素P450 2C11抗体
Cytochrome P450 2C11
人层粘连蛋白β1(LN-β1)elisa分析检测试剂盒
PH2-3显色(CRESOL RED)指示溶液
小鼠整合素α5(Itgax/CD11c)elisa检测试剂盒
大鼠内皮素转化酶1(ECE1)elisa检测试剂盒
OTUD7A蛋白抗体
OTUD7A
血红蛋白γ2抗体
Hemoglobin subunit gamma 2
转移生长因子α抗体(TGFα) Anti-TGF alpha
粘着斑激酶抗体 Anti-FAK/PTK2
磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶β1抗体 Anti-phospho-AMPK beta 1 (Ser182)
转录调节因子DEC2抗体 Anti-SHARP1/DEC2
激肽原1重链抗体
Lysyl-bradykinin
嗅觉受体ai1抗体
Orai1
锌指蛋白195抗体 Anti-ZNF195
神经调节肽S抗体 Anti-NMS/Neuromedin S
RNA结合蛋白38抗体 Anti-RBM38
脑磺基转移酶样蛋白4A1抗体 Anti-SULT4A1
大鼠Kelch样ECH相关蛋白1(KEAP1)elisa分析检测试剂盒
大鼠肾小管上皮细胞KEAP1 ELISA kit
人谷胱甘肽S转移酶TT(GSTπ)elisa分析检测试剂盒
5-beta-cholestane-3-alpha, 7-alpha, 12-alpha-triol 26-hydroxylase; 5-beta-cholestane-3-alpha, 7-alpha, 12-alpha-triol 27-hydroxylase; 5-beta-cholestane-3-alpha,7-alpha,12-alpha-triol 27-hydroxylase; Cholestanetriol 26 monooxygenase; CP27; CTX; CYP; CYP27; Cytochrome P 450C27/25; Cytochrome P450 27; Cytochrome P450 27 mitochondrial; Cytochrome P450 family 27 subfamily A polypeptide 1; CP27A_HUMAN; Cytochrome P450 subfamily XXVIIA (steroid 27-hydroxylase cerebrotendinous xanthomatosis) polypeptide 1; Sterol 26 hydroxylase; Sterol 26 hydroxylase mitochondrial; Sterol 27 hydroxylase; Vitamin D(3) 25 hydroxylase.
大鼠肾小球内皮细胞
小鼠牙龈成纤维细胞
GES-1人胃粘膜细胞
BCL2 Jurkat儿童急性T细胞白血病细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。