
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
大鼠肝星状细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
肝脏组织
生长特性
贴壁
细胞形态
成纤维细胞样
分类
大鼠原代细胞
货号
A01X1570
用途
仅供科研实验
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右;3代以内状态佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
大鼠肝星形细胞分离自肝脏组织;肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官,并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用;肝脏也**消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里大的器官,位于机体中的腹部位置,在右侧横隔膜之下,位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方,胃的上方。肝脏是机体消化系统中大的消化腺,为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官,又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构:肝脏位于右上腹,隐藏在右侧膈下和肋骨深面,大部分肝为肋弓所复盖,仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁,肝上面则与膈及腹前壁相接。肝星形细胞(HSC)又名肝贮脂细胞、维生素A贮存细胞、窦周细胞、Ito细胞等,是肝脏细胞外基质的主要来源。HSC在激活后可进一步转化为肌成纤维细胞样细胞,各种可导致肝纤维化的因素均将HSC作为终靶细胞。正常情况下,HSC处于静止状态,当肝脏发生炎症反应或受到机械刺激等损伤时,HSC的表型由静止型转变为激活型,激活的HSC可通过增生和分泌细胞外基质参与肝纤维化的形成及肝内结构的重建,此过程也是肝纤维化的中心环节。肝星形细胞分布于肝脏的Disse间隙内,是合成、分泌细胞外基质的主要来源,在肝纤维化的发生中处于重要地位。肝星形细胞是肝脏的间充质细胞,约占肝脏细胞总数的8%-13%。作为肝脏合成细胞外基质的主要细胞群,肝星形细胞不仅能分泌蛋白多糖、糖蛋白等细胞外基质成分,合成一定量的胶原酶以维持正常的基底膜结构,还能通过其突起的收缩参与肝窦的微循环调节。此外,肝星形细胞能通过合成肝细胞生长因子、胰岛素样生长因子、表皮生长因子等促进肝细胞增殖和肝再生。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠肝星形细胞采用混合酶灌流消化、低速离心、密度梯度离心制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠肝星状细胞经α-SMA、Desmin荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品:
MMP-8ELISAkit
大鼠1,25-二羟维生素D(3)24-羟化酶,线粒体(CYP24A1)elisa分析检测试剂盒
mitochondrial(CYP24A1)ELISA kit
人分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)elisa分析检测试剂盒
HumanSFRP5ELISAKit
小鼠补体成分4(C4)elisa检测试剂盒
AEC显色试剂盒
CASPASE-3蛋白表达ELISA定量检测试剂盒
谷胱甘肽S-转移酶(GST)测试盒
胰岛素生长因子样家族成员1抗体
IGFL1
17号染色体开放阅读框104抗体
C17orf104
小鼠粒细胞集落刺激因子(G-CSF)elisa检测试剂盒免费代测
大鼠分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)elisa检测试剂盒
前列D合成酶(prostaglandin D synthase)活性比色法定量检测试剂盒
人蛋白酶3抗体(PR3Ab)elisa分析检测试剂盒
核仁源蛋白17抗体
PIH1D1
热休克蛋白70样蛋白1抗体
HSPA14
腱调蛋白抗体(软骨调节素样1蛋白) Anti-TNMD/tenomodulin
蛋白酶体PSMα1抗体 Anti-Proteasome 20S C2
多形性腺瘤基因样蛋白2抗体 Anti-PLAGL2
鞘磷脂合成酶2抗体 Anti-Sphingomyelin Synthase 2
PE-Cy7标记的羊抗鸡IgG H&L
大鼠肝星状细胞Goat Anti-Chicken IgG H&L / PE-Cy7
肝黄素单加氧酶1抗体
ACUG; Arthrocutaneouveal granulomatosis; BLAU; CARD15; Caspase recruitment domain protein 15; Caspase recruitment domain-containing protein 15; CD; IBD1; Inflammatory bowel disease protein 1; LRR containing protein; LRR-containing protein; Nod2; NOD2 protein; NOD2_HUMAN; NOD2B; nucleotide binding oligomerization domain 2; nucleotide-binding oligomerization domain 2; Nucleotide-binding oligomerization domain-containing protein 2; PSORAS1.
大鼠睾丸间质细胞
猪肾上腺髓质细胞
A549/Tax人肺腺癌紫杉醇耐药性细胞
8505C人甲状腺癌细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。