产品名称：PLC/PRF/5人肝癌细胞

商品属性：

细胞培养操作：

1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养，补加培养基至6ml。24-48h后换液。 
2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。
c、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，加1-2mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。 
3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；
a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

商品详情：

生长特性 贴壁细胞

细胞形态 上皮细胞样

冻存条件

冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度：液氮

培养方案A（默认）

生长培养基:

MEM（含NEAA）＋10% FBS＋1% P/S

培养条件:

气相：空气，95%；CO2，5%, 温度：37℃

推荐传代比例 1:2-1:4

推荐换液频率 2-3次/周

参考资料(来源文献)

背景描述 PLC/PRF/5细胞分泌乙肝病毒表面抗原(HBsAg)；PLC/PRF/5细胞原先被支原体污染，后用BM-cycline去除支原体。

组织来源 肝癌；亚力山大细胞

细胞类型 肿瘤细胞

肿瘤类型 肝胆癌细胞

生物等级 BSL-2 [Cells contain hepatitis B]

倍增时间 ~36-48 hours

基因表达情况 hepatitis virus B surface antigen (HBsAg)

保藏机构 ATCC; CRL-8024 ECACC; 85061113

Zyxin       短链脱氢酶/还原酶家族7B抗体

MYCNOS蛋白抗体       MYCNOS

臂板蛋白4C抗体  Anti-Sema4C/SEMA5A       斑联蛋白抗体

味觉受体蛋白家族2亚基50抗体  Anti-T2R50       磷酸化Rho GTP酶激活蛋白1/血管畸形骨肥大综合征相关蛋白抗体  Anti-phospho-RASA1 (Tyr460)

核基质结合区结合蛋白1抗体  Anti-SATB1       神经营养因子-3前蛋白抗体  Anti-Neurotrophin 3/NT-3 proprotein

3号染色体开放阅读框18抗体       C3orf18

NIT2蛋白抗体  Anti-NIT2      DHRS7B

维甲酸相关孤儿受体α抗体  Anti-ROR1/ROR alpha       睾丸特异定蛋白质编码Y1抗体  Anti-TSPY1山羊白介素2(IL-2)elisa生化检测试剂盒       IL-2ELISAKit

小鼠α-骨胶原交联(αCTx)elisa检测试剂盒       脂肪酶LPS测试盒 96T 50管/48样 微板法

大鼠低密度脂蛋白受体(LDLR)elisa生化检测试剂盒       LDLR ELISA Kit

硝酸盐还原酶定性检测试剂盒       人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3(MAPKAPK3)elisa生化检测试剂盒

大鼠碘甲腺原氨酸脱碘酶Ⅰ(DIO1)elisa检测试剂盒       小鼠转化生长因子β2(TGF-β2)elisa检测试剂盒

KCNH7蛋白抗体       KCNH7

PLC/PRF/5人肝癌细胞Rho GTP酶激活蛋白15抗体       ARHGAP15

大鼠载脂蛋白A1(apo-A1)elisa检测试剂盒       载玻片细胞FSH-BETA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒

细胞传代培养操作步骤：
（1）当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时，进行传代。
（2）吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次，摇匀后弃掉。
（3）加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培养瓶放入37℃培养箱进行消化，3min左右拿出，用显微镜观察细胞有无超过80%的量，发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均匀，避免消化过度。
（5）细胞悬液吸至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。
（6）吸弃上清，加入培养液重悬细胞，吹打细胞使其均匀分散。
（7）吸弃细胞悬液，选择适合的密度接种到新培养瓶中，补充培养液并摇匀，放置37℃的CO2培养箱进行培养。
（8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间。
（9）细胞冻存。