商品属性：
产品名称
英文名称
A549+luc:A549luc
产品货号
A01X649
培养条件
生长特性
贴壁生长
细胞形态
上皮细胞样，多角形；
产品种属
人
冻存条件
详见说明
组织来源
肺癌
用途
仅供科研研究实验
商品详情：
细胞介绍
该细胞系由D.J.Griad通过肺癌组织移植培养建系，患者为58岁白人男性。A549能通过胞苷二磷酸胆碱途径合成含有高含量不饱和脂肪酸的卵磷脂。
该细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。
细胞特性
1） 来源：肺癌
2） 形态：上皮细胞样，多角形；贴壁生长
3） 含量：>1×10⁶ 细胞数
4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
5） 用途：仅供科研使用
细胞诱导构建实验步骤：
1. 转染 （1）将A549细胞接种6孔板，每孔细胞数约为1×10⁵ 个，
（2）天，细胞融合度为50%左右时用于病毒转染，
（3）加入1mL培养基，再加20 μL Luciferase过表达慢病毒，
（4）混匀后继续培养，
（5）12h后观察细胞状态，并更换为新鲜培养基，
（6）当细胞长满板底后，传代至T25培养瓶中。
2. 筛选：用嘌呤霉素4ug/mL抗性筛选6周，稳转细胞记作A549+Luc。
3. 体外荧光素酶活性检测
细胞培养操作：
1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养，补加培养基至6ml。24-48h后换液。
2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。
c、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，加1-2mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。
3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；
a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
细胞传代培养操作步骤：
（1）当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时，进行传代。（2）吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次，摇匀后弃掉。
（3）加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培养瓶放入37℃培养箱进行消化，3min左右拿出，用显微镜观察细胞有无超过80%的量，发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均匀，避免消化过度。
（5）细胞悬液吸至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。
（6）吸弃上清，加入培养液重悬细胞，吹打细胞使其均匀分散。
（7）吸弃细胞悬液，选择适合的密度接种到新培养瓶中，补充培养液并摇匀，放置37℃的CO2培养箱进行培养。
（8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间。
（9）细胞冻存。
公司正在出售的产品：
p21激活激酶2抗体 PAK2
SEC63域内含蛋白1抗体 HFM1
促甲状腺素受体抗体（C端） Anti-TSHR (CT) 胰岛素促进因子抗体（胰十二指肠源异型盒蛋白） Anti-PDX1
蛋白酶体复合物C5抗体 Anti-PRS3/PRE7 转录因子蛋白SIM1抗体 Anti-SIM1
甲基（）单克隆抗体 Methamphetamine(4D2)
G蛋白偶联受体80抗体 OXGR1/GPR80
EGF应答因子1抗体抗体 Anti-ZFP36L1/ERF1 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶NEK8抗体 Anti-NEK8
视黄酸受体应答蛋白1抗体 Anti-RARRES1/TIG1 S100钙结合蛋白A7抗体 Anti-S100A7/Psoriasin
大鼠D-甘油醛3-磷酸elisa分析检测试剂盒 Rat D-glyceraldehyde 3-phosphate ELISA Kit
人钩端螺旋体IgM(Lebtospira)elisa分析检测试剂盒 HumanLebtospiraIgMELISAKit
Rac1鸟苷酸酶活性分析试剂盒 小鼠Slit2 elisa分析检测试剂盒
大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白5(IGFBP-5)elisa检测试剂盒 细胞NF KAPPA B P65蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒
转录因子MAFF抗体 MAFF
A549+luc 人肺癌细胞荧光素酶标记无精症缺失基因1抗体 DAZ1
胰岛素样生长因子结合蛋白样1抗体 IGFBPL1
蛋白激酶A锚定蛋白6抗体 AKAP6