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PCR反应的特异性主要决定因素
日期：2025-04-28 16:53
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摘要：
PCR反应的特异性主要决定因素：
1、引物。引物的结构和长度是PCR特异性的关键。此外，引物浓度过高会增大形成引物二聚体的概率，从而降低PCR特异性。
2、复性温度。在Tm值允许范围内，选择较高的复性温度可大大减少引物和模板间的非特异性结合，提高PCR反应的特异性。
3、延伸时间。延伸时间过长会导致非特异性扩增带的出现。
4、Mg2+浓度。Mg2+浓度对PCR扩增的特异性有显著影响。Mg2+浓度过高时，容易出现非特异性扩增，使反应特异性降低。
5、DNA聚合酶的种类和数量。不同种类的酶对PCR特异性的影...
PCR反应的特异性主要决定因素：
1、引物。引物的结构和长度是PCR特异性的关键。此外，引物浓度过高会增大形成引物二聚体的概率，从而降低PCR特异性。
2、复性温度。在Tm值允许范围内，选择较高的复性温度可大大减少引物和模板间的非特异性结合，提高PCR反应的特异性。
3、延伸时间。延伸时间过长会导致非特异性扩增带的出现。
4、Mg2+浓度。Mg2+浓度对PCR扩增的特异性有显著影响。Mg2+浓度过高时，容易出现非特异性扩增，使反应特异性降低。
5、DNA聚合酶的种类和数量。不同种类的酶对PCR特异性的影响程度不同；酶的量过多更容易引起非特异性扩增。