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逆转录实验优化及注意事项
日期：2025-04-29 17:14
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摘要：
逆转录（reverse transcription）是以 RNA 为模板合成 DNA 的过程，即 RNA 指导下的 DNA 合成。优化及注意事项：
1、逆转录 PCR 时，提取 RNA 是关键，需分离高质量 RNA（纯度和完整性）。
2、整个操作过程需使用去 RNA 酶的枪头、EP 管等耗材。
3、 逆转录过程中要谨防 RNA 酶的污染，加入 RNA 酶抑制剂。
4、 为了防止非特异性扩增，必须设阴性对照。
5、逆转录实验应全程在冰上操作完成，操作过程应避免 RNase 污染。
6、 提高...
逆转录（reverse transcription）是以 RNA 为模板合成 DNA 的过程，即 RNA 指导下的 DNA 合成。优化及注意事项：
1、逆转录 PCR 时，提取 RNA 是关键，需分离高质量 RNA（纯度和完整性）。
2、整个操作过程需使用去 RNA 酶的枪头、EP 管等耗材。
3、 逆转录过程中要谨防 RNA 酶的污染，加入 RNA 酶抑制剂。
4、 为了防止非特异性扩增，必须设阴性对照。
5、逆转录实验应全程在冰上操作完成，操作过程应避免 RNase 污染。
6、 提高逆转录预热温度（也可根据相应逆转录试剂盒进行调整）。
7、 减少基因组 DNA 污染，可使用去基因组的逆转录试剂盒。