ELISA检测阴性对照（品）的概念与要求

ELISA检测，按照试剂说明书要求，每次试验、每块扳上都要设置阴性对照（品）对照。

1、阴性对照（品）的概念与要求：
所谓阴性对照（品），应当是本项检测试验中采用与待捡物（样品、人用试剂就是人的血清等）具有同源性和同质性，又不含有待检物质，并能客观比较和鉴别处理因素（血清免 疫学试验中有特异性抗原与抗体反应）之间的差异。因此，用动物血清或其制品（如牛血清白蛋白等）代替阴性人血清作为对照品，从理论和实践上都是不可取的，弊端甚多，无须细述。注意：据我所知，国产ELISA试剂中，有的厂牌是用动物血清制品稀释配置、或与部分人血清混合配置的；其二，阴性对照读数，并非是“越低越好"。NCx值接近0.00X水平，这是假象！试想一下，真正采用“阴性人血清"的阴性对照品，NCx值会如此之低吗？举个例子，雅培乙肝六项EIA试剂的NCx值，分别为：0.010（HBsAg）、0.027（抗—HBs）、0.035（HBeAg）、1.083（抗—HBe）、1.065（抗—HBc）、0.045（抗HBc-IgM）。生物梅里埃的HIV试剂NCx是0.091。辨别试剂NCx值是否合理的一个很简单的方法，只要对比大量阴性样本的实际读数就“一目了然"啦！
一个题外插曲：表明ELISA试剂内在质量的一个重要统计标志，就是要看：阴性样本的的上限不应当大于、必须小于C.O.I.=1.00；反之，阳性样本的的下限不可小于、应当大于C.O.I.=1.00！早年我用SPSS软件输出阿克苏HIV和国产甲、乙试剂检测600例左右的健康人体检血清的三幅直方图，可以表明阴性样本的不同分布特征，颇有意思。  
我为什么要如此细说NCx呢？因为NCx值在Cut off值计算中是相当举足轻重的（详后）。

2、阴性对照（品）分为两类
一是代表受检人血清中并不含有、或方法学灵敏度未能检出的待检物的基准水平，并且是结果判断值（Cut off）计算式中决定“是"（阳性）、或“否"（阴性）的唯 1可变值。阴性对照值高，导致假阴性；反之，导致假阳性。如：HBsAg、HBeAg、抗—HBc等。二是阴性对照设置，在方法学上要求加入指示性定量标准品，如中和剂HBeAg，定量HBcAg等，用以检测抗—HBe、抗—HBc。或者，选取代表平均水平的正常人血清用作阴性对照，如检测抗—HBc IgM。此类Cut off 值计算时，多数均包括阴性和阳性对照值2个可变值。