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生化试剂,标准品,对照品,PCR试剂盒, 核酸检测试剂盒,荧光定量检测试剂盒,生化试剂盒 ,比色法试剂盒,酶活性检测试剂盒,ELISA试剂盒,酶联免yi检测试剂盒,试剂盒,ELISA试剂盒,抗体,重组蛋白,分光光度法检测试剂盒,细胞株,原代细胞,细胞培养基,标准溶液产品。代理并销售进口SIGMA试剂、abcam抗体、R&D抗体、CST抗体、ATCC细胞、BD公司、GE公司、赛默飞世尔公司产品。
解决qPCR无Ct信号出现现象
日期:2025-04-29 11:13
浏览次数:1979
摘要:
解决qPCR无Ct信号出现现象:
1、反应循环参数不够,一般要在35个循环以上,但是过多的循环次数可增加背景值。
2、检测荧光信号的步骤有误。SYBRgreen法(SG法)采用的是72延伸时采集荧光信号,taqman法则是在退火结束或延伸结束时进行信号采集。
3、引物或探针降解,可用PAGE电泳检测其完整性,若是电泳条带呈弥散状,可考虑重新合成引物或探针。
4、模板不足或降解,则可以重新提取核酸模板。
解决qPCR无Ct信号出现现象:
1、反应循环参数不够,一般要在35个循环以上,但是过多的循环次数可增加背景值。
2、检测荧光信号的步骤有误。SYBRgreen法(SG法)采用的是72延伸时采集荧光信号,taqman法则是在退火结束或延伸结束时进行信号采集。
3、引物或探针降解,可用PAGE电泳检测其完整性,若是电泳条带呈弥散状,可考虑重新合成引物或探针。
4、模板不足或降解,则可以重新提取核酸模板。