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解决qPCR无Ct信号出现现象
日期：2024-05-10 07:25
浏览次数：1829
摘要：
解决qPCR无Ct信号出现现象：
1、反应循环参数不够，一般要在35个循环以上，但是过多的循环次数可增加背景值。
2、检测荧光信号的步骤有误。SYBRgreen法（SG法）采用的是72延伸时采集荧光信号，taqman法则是在退火结束或延伸结束时进行信号采集。
3、引物或探针降解，可用PAGE电泳检测其完整性，若是电泳条带呈弥散状，可考虑重新合成引物或探针。
4、模板不足或降解，则可以重新提取核酸模板。
解决qPCR无Ct信号出现现象：
1、反应循环参数不够，一般要在35个循环以上，但是过多的循环次数可增加背景值。
2、检测荧光信号的步骤有误。SYBRgreen法（SG法）采用的是72延伸时采集荧光信号，taqman法则是在退火结束或延伸结束时进行信号采集。
3、引物或探针降解，可用PAGE电泳检测其完整性，若是电泳条带呈弥散状，可考虑重新合成引物或探针。
4、模板不足或降解，则可以重新提取核酸模板。