简述ELISA试剂盒参考标准

小结了ELISA试剂盒参考标准如下：

首先、规范曲线

1.定量办法：规范曲线zui少由5个浓度组成，测定次数不少于5次，以断定作业浓度规模和IC50规模。

2.定性办法：作业浓度规模经过阴性、临界值浓度和阳性的样品测定来断定，每个浓度重复不少于5次，浓度与响应值之间应有必定的。

其次、检查限和定量限

1.检查限：20份空白样品测定均值加3倍规范差。

2.定量限：应大于规范曲线中zui低浓度点。关于定量办法，应对该浓度样品zui少测定6次进行验证，而不能经过外延法揣度。

第三、临界值（cut-off值）的断定

关于有zui高残留定量的药wu，检查办法的临界值为20份增加MRL浓度的样品重复3次测定的均值减去1.64倍规范差，即95%置信限处。

关于禁用药wu，检查办法的临界值为定量限，该值应到达公认的目标。

第四、ELISA试剂盒精密度和准确度

关于有zui高残留定量的药wu，增加浓度为MRL及MRL上下各一个浓度；关于禁用药wu，增加浓度为定量限和2倍定量限，每个增加浓度zui少测定5个平行样，并zui少进行3批实验（不一样检查日期，不一样规范曲线，不一样批次试剂盒）。

1.准确度：回收率规模大于40%或契合相应检查规范的要求。

2.精密度：以变异系数表明。

批内变异系数：每批平行样之间的变异系数小于或等于25%，关于禁用药wu小于或等于30%.

批间变异系数：一切样品之间的变异系数值小于或等于30%，elisa试剂盒关于禁用药wu小于或等于40%.

定性办法：阴性和阳性样品各测定不少于50份，断定假阳性率和假阴性率。

第五、穿插反应

试剂盒与待检药wu类似物、代谢物或一起存在的药wu测定穿插反应率。

第六、保留期

保留期经过保留条件的稳定性实验结果断定。

第七、复核实验

1.定量办法：检查限、IC50以及zui少两个增加浓度的准确度和精密度，并与理化办法（或与具代表性进口试剂盒）对比。

2.定性办法：检查限、假阳性率和假阴性率。