
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
小鼠主动脉弓平滑肌细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
主动脉组织
生长特性
贴壁培养
细胞形态
长梭形
分类
小鼠原代细胞
货号
A01X1789
用途
仅供科研实验
细胞特性:
1) 组织来源于实验动物的正常主动脉组织。
2) 细胞鉴定:平滑肌肌动蛋白(α-SMA)荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5) 细胞生长方式:长梭形,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF原代内皮细胞培养体系 作为该细胞的培养基。
细胞简介:
血管发生和发展的一个主要因素是由于血管平滑肌细胞( smooth
muscle cells, SMCs)转变成为了具有繁殖能力的表型。近期的研究表明平滑肌细胞能表达钙离子通道,ICAM-1和VCAM-1。其中ICAM-1和VCAM-1的表达可能是造成血管壁炎症反应,并进一步造成血管的原因
。
因此,对血管平滑肌细胞的体外培养和研究可用来发现和确定新的血管的靶向方法。
公司正在出售的产品:
Kim-1ELISAKit
大鼠补体蛋白3(C3)elisa分析检测试剂盒
C3 ELISA Kit
人极低密度脂蛋白(VLDL)elisa分析检测试剂盒
VLDLELISAKit
大鼠腺病毒抗体(FL/K87-Ab)elisa检测试剂盒
石蜡切片组织PAR-3蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
小鼠CD33分子(CD33)elisa检测试剂盒
一步法荧光定量PCR反应液
鱼血管紧张素转化酶(ACE)elisa分析检测试剂盒
ACE ELISA kit
人成纤维细胞生长因子8(FGF8)elisa分析检测试剂盒
HumanFGF8ELISAKit
人白介素4受体(IL4R/CD124)elisa分析检测试剂盒
组织磷脂酶D2(Phospholipase D2)活性荧光定量检测试剂盒
小鼠纤维连接蛋白(FN)elisa检测试剂盒
大鼠可溶性肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂(sTWEAK)elisa检测试剂盒
NADH氧化还原酶辅酶2抗体
NDUFA2
γ氨基丁酸受体相关蛋白样3抗体
GABARAPL3
硫氧还蛋白11抗体 Anti-TXNDC11
前列腺素E2抗体 Anti-PGE2
眼部白化病相关蛋白OA1/蛋白偶联受体143抗体 Anti-OA1/GPR143
5-脂氧合酶抗体 Anti-5 lipoxygenase
Cy5标记的兔抗人IgG H&L
小鼠主动脉弓平滑肌细胞Mouse Anti-Bovine IgG H&L / PE-Cy5.5
FBN3蛋白抗体
MAJN; TGFB1 induced anti apoptotic factor 1 (12 kDa TGF beta1 induced antiapoptotic factor); 12 kDa TGF-beta-1-induced antiapoptotic factor; TGFB1 induced anti apoptotic factor 1; TGFB1-induced anti-apoptotic factor 1; TIAF1_HUMAN; MAJN; SPR210; MYO18A; MYSPDZ; TGFB1 induced anti apoptotic factor 1.
小鼠主动脉弓平滑肌细胞
大鼠骨髓间充质干细胞
Lu-143人小细胞肺癌细胞
人舌鳞癌细胞;UPCI:SCC152
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。