
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
小鼠肾足细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
肾脏组织
生长特性
贴壁培养
细胞形态
不规则 含足突细胞
分类
小鼠原代细胞
货号
A01X1836
用途
仅供科研实验
细胞特性:
1)细胞来源于实验动物正常肾脏组织。
2)细胞鉴定:广谱角蛋白(PCK)或WT-1(Wilm'sTumorProtein)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:不规则,含足突细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF原代 肾足 细胞培养体系 作为该细胞的培养基。
细胞简介:
肾小球为血液过滤器,肾小球壁构成过滤膜。肾小球过滤膜从内到外有三层结构:内层为内皮、中层为肾小球基膜、外层为上皮细胞层,上皮细胞又称足细胞,其不规则突起称足突,其间有许多狭小间隙,血液经滤膜过滤后,滤液入肾小球囊。在正常情况下,血液中绝大部分蛋白质不能滤过而保留于血液中,仅小分子物质如尿素、葡萄糖、电解质及某些小分子蛋白能滤过。
肾足细胞即肾小球上皮细胞,它附着于肾小球基底膜的外侧,连同肾小球基底膜和肾小球基膜一起构成了肾小球血液滤过屏障。又由于正常成年机体的肾脏足细胞是一种终末分化细胞,体外培养的原代细耀ãή
公司正在出售的产品:
C4aELISAKit
猴γ干扰素(IFN-γ)elisa分析检测试剂盒
IFN-γ ELISA Kit
人多效生长因子(PTN)elisa分析检测试剂盒
HumanpleiotrophinELISAKit
DH5α钙转感受态
乳酸脱氢酶(LDH)测试盒
大鼠抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)elisa检测试剂盒免费代测
无胎牛血清(活性碳/葡聚糖处理)
ING4抗体
ING4
2号染色体开放阅读框69抗体
C2orf69
标准溶液
人α-黑色素细胞刺(α-MSH)elisa分析检测试剂盒
大鼠白介素1受体样1(IL1RL1)elisa检测试剂盒
小鼠透明质酸(HA)elisa分析检测试剂盒
TP53调节激酶抗体
PRPK
细胞纤毛内转运源蛋白81抗体
IFT81
人状瘤E6相关蛋白抗体 Anti-UBE3A/E6-AP
磷酸乙醇胺转移酶A抗体 Anti-PCYT1A
朊蛋白CD230抗体 Anti-Prion protein PrP/CD230
突触样蛋白5亚型2抗体 Anti-SYTL5/slp5
Cy5.5标记的羊抗牛IgG H&L
小鼠肾足细胞S-100B ELISA Kit
人胱天蛋白酶10(CASP10)elisa分析检测试剂盒
AF 1P; AF 1p protein; AF1P; ALL1 fused gene from chromosome 1; Epidermal growth factor receptor pathway substrate 15; Epidermal growth factor receptor substrate 15; EPS 15; MLLT 5; MLLT5; Protein Eps 15; Protein Eps15; EPS15_HUMAN.
小鼠肾足细胞
大鼠结膜上皮细胞
JMSU1人膀胱癌细胞
人结直肠癌氟尿嘧啶耐药株;HCT15/Fu
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。